HMGA1在甲狀腺癌SW579細(xì)胞中對Snail表達(dá)的調(diào)控作用及機(jī)制的初步研究.pdf

1、目的：研究HMGA1對甲狀腺癌SW579細(xì)胞Snail表達(dá)的影響，并對其作用機(jī)制進(jìn)行初步探討，為揭示HMGA1相關(guān)的Snail的發(fā)生機(jī)制提供一種新的思路。
　　方法：用免疫組化的方法檢測HMGA1抗體在組織組合芯片上的表達(dá)，并對HMGA1與甲狀腺癌組織的臨床參數(shù)相關(guān)性進(jìn)行分析。采用RT-PCR、Western-blot技術(shù)檢測SW579細(xì)胞中HMGA1沉默后Snail在mRNA與蛋白水平的表達(dá)；將構(gòu)建成功的Snail基因的啟動子蟲

2、熒光素酶報告質(zhì)粒與HMGA1表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染SW579細(xì)胞，利用雙熒光素酶報告系統(tǒng)，檢測HMGA1對Snail啟動子活性的影響。
　　結(jié)果：
　　1.組織芯片結(jié)果顯示：HMGA1在甲狀腺癌組織中表達(dá)明顯高于正常甲狀腺組織，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在甲狀腺癌組織中，HMGA1在女性甲狀腺癌患者的陽性表達(dá)率顯著高于男性甲狀腺癌患者，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；HMGA1的表達(dá)與病理分型有相關(guān)性，在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)顯著

3、高于濾泡狀癌和未分化癌，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HMGA1的表達(dá)與患者的年齡和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P﹥0.05)；
　　2.甲狀腺癌SW579細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染HMGA1 siRNA序列48h后，RT-PCR、Western blot結(jié)果顯示HMGA1 siRNA組與細(xì)胞對照組比較，HMGA1、Snail在mRNA及蛋白水平的表達(dá)均降低；
　　3.成功構(gòu)建了Snail啟動子的熒光素酶報告質(zhì)粒，證明了該啟動子有明顯活性。將Sn