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1、目的:通過對體外人腎小球系膜細胞的原代培養(yǎng),觀察苦參素對LPS誘導的人腎小球系膜細胞(HMC)增殖過程中磷酸化信號轉(zhuǎn)導和轉(zhuǎn)錄活化因子3(p-STAT3)和細胞因子信號抑制因子3(SOCS3)的表達及相互關(guān)系。 方法:將體外原代培養(yǎng)的HMC,分為正常組、LPS(10㎎/L)組、LPS(10㎎/L)+苦參素(320㎎/L)組,每組分3個時間點(12,24,48 h)。采用MTT法檢測HMC的增殖,實時熒光定量RT-PCR方法檢測ST
2、AT3和SOCS3mRNA的表達,Western Blot方法檢測p-STY3和SOCS3蛋白的表達。 結(jié)果:與正常組相比,LPS能夠促進HMC增殖(P<0.01),且LPS誘導組p-STAT3蛋白在12 h表達上調(diào)不明顯(P>0.05),在24,48 h表達明顯上調(diào)(P<0.01),SCOS3蛋白在12,24,48 h表達均上調(diào)(P<0.01),另STAT3 mRNA的表達在12,24,48h均上調(diào),同時SOCS3mRNA表達
3、也上調(diào)(P<0.01);與LPS誘導組相比,苦參素對這種增殖有明顯的抑制作用(P<0.01),且苦參素組p-STAT3在12 h表達下調(diào)不明顯(P>0.05),24,48 h表達明顯下調(diào)(P<0.01),而SOCS3蛋白表達各時間段均有明顯上調(diào)的趨勢(P<0.01),另STAT3mRNA表達在12,24,48 h均下調(diào),而SOCS3 mRNA表達有明顯上調(diào)的趨勢(P<0.01)。 結(jié)論:LPS能誘導的HMC增殖,苦參素對這種增殖
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