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1、目的:本研究通過(guò)對(duì)比檢測(cè)組織蛋白酶K(Cath-K)在正常和退變?nèi)俗甸g盤中的表達(dá),進(jìn)一步探討Cath-K在人椎間盤生理和病理?xiàng)l件下細(xì)胞外基質(zhì)改變的關(guān)系,并探討Cath-K與椎間盤退變的相關(guān)性,為椎間盤退變機(jī)理的研究及延緩和治療椎間盤退變提供理論依據(jù)。 方法:用免疫組化S-P法和ISA法對(duì)30例腰椎間盤突出癥患者椎間盤組織中Cath-K進(jìn)行檢測(cè),并取脊柱骨折手術(shù)病人標(biāo)本7例和新鮮尸檢標(biāo)本8例正常椎間盤組織共15例作對(duì)照。實(shí)驗(yàn)所用椎
2、間盤標(biāo)本取自術(shù)中(2006年3月至2007年4月在新疆石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院骨一科脊柱手術(shù)治療的患者)及新鮮尸體。退變組取白腰椎間盤突出癥行MED術(shù)患者,正常組取自無(wú)椎間盤突出癥的脊柱骨折手術(shù)自愿捐獻(xiàn)患者和尸檢椎間盤標(biāo)本,術(shù)中所取標(biāo)本經(jīng)MRI T2加權(quán)信號(hào)改變和術(shù)后病理檢驗(yàn),尸檢標(biāo)本經(jīng)病理檢查驗(yàn)證所取標(biāo)本的可靠性。每一例標(biāo)本常規(guī)HE染色后進(jìn)行病理診斷,將已制成4μm切片標(biāo)本應(yīng)用免疫組化鏈霉素親生物素-過(guò)氧化物酶法(S-P法)對(duì)切片分別進(jìn)行抗C
3、ath-K單克隆抗體染色,顯微鏡下觀察顯色情況,隨機(jī)選取5個(gè)高倍視野,以Cath-K在胞漿被染成棕黃色為陽(yáng)性,計(jì)數(shù)陽(yáng)性細(xì)胞百分率和觀察染色強(qiáng)度,以二者乘積得分作為陽(yáng)性強(qiáng)度判斷依據(jù),進(jìn)行陽(yáng)性強(qiáng)度判斷,行陽(yáng)性率統(tǒng)計(jì)并行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。組織勻漿中Cath-K行Elisa法測(cè)定后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。 結(jié)果:免疫組化染色顯示,Cath-K染色定位于細(xì)胞漿。在實(shí)驗(yàn)組中,多數(shù)標(biāo)本Cath-K陽(yáng)性細(xì)胞較多,陽(yáng)性率>90%:在對(duì)照組中,Cath-K陽(yáng)性細(xì)
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