肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）對(duì)系統(tǒng)性病皮硬皮膚成纖維細(xì)胞Ⅰ型膠原的影響及其可能機(jī)制.pdf

1、目的：研究肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子對(duì)系統(tǒng)性硬皮病患者皮膚成纖維細(xì)胞中Ⅰ型膠原表達(dá)的影響并探討其可能的機(jī)制，為臨床尋找有效的治療系統(tǒng)性硬皮病的方法提供依據(jù)。 方法： 1.系統(tǒng)性硬皮病患者及正常人皮膚活檢標(biāo)本各5例進(jìn)行成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)，用角蛋白和波形蛋白染色進(jìn)行成纖維細(xì)胞的鑒定。 2.MTT法檢測(cè)HGF對(duì)皮膚成纖維細(xì)胞增殖活性的影響。 3.RT-PCR方法檢測(cè)SSc患者及正常人皮膚成纖維細(xì)胞中Ⅰ型膠原、COX-1、C

2、OX-2的mRNA表達(dá)水平。 4.RT-PCR方法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)HGF對(duì)SSc患者皮膚成纖維細(xì)胞中Ⅰ型膠原、COX-2的mRNA表達(dá)水平的影響。 5.選擇性COX-2抑制劑NS398與HGF聯(lián)合干預(yù)后，RT-PCR方法檢測(cè)不同時(shí)間點(diǎn)SSc皮膚成纖維細(xì)胞中Ⅰ型膠原mRNA表達(dá)水平的變化。 結(jié)果： 1.培養(yǎng)細(xì)胞具有成纖維細(xì)胞的形態(tài)，角蛋白染色陰性，波形蛋白染色陽(yáng)性。 2.20ng/ml HGF在48小

3、時(shí)內(nèi)對(duì)皮膚成纖維細(xì)胞的增殖活性無(wú)明顯影響。 3.SSc患者皮膚成纖維細(xì)胞與正常人皮膚成纖維細(xì)胞相比，COX-2的mRNA表達(dá)下降，Ⅰ型膠原的mRNA表達(dá)增加，而COX-1的mRNA表達(dá)無(wú)明顯差異。 4.HGF可誘導(dǎo)SSc皮膚成纖維細(xì)胞中COX-2 mRNA的表達(dá)(P<0.05)，其表達(dá)量與HGF的作用呈時(shí)間依賴性遞增。HGF可抑制SSc皮膚成纖維細(xì)胞中Ⅰ型膠原mRNA的表達(dá)(P<0.05)，其表達(dá)量與HGF的作用呈時(shí)間依