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文檔簡介
1、目的:利用天然活性物質(zhì)進行抗病毒治療研究是近幾年發(fā)展起來的抗病毒治療新技術(shù),已顯示出巨大的應(yīng)用潛力。2,3-吲哚醌就是來自于海洋生物龍蝦并維持其生存所必需的一種天然海洋抗生素,現(xiàn)已證實也是存在于中藥青黛以及人體的內(nèi)源性活性物質(zhì)。有報道2,3-吲哚醌的某些衍生物具有抗病毒作用,但是對2,3-吲哚醌的抗病毒活性研究尚未見報道。本課題旨在通過建立SV感染細胞模型和動物模型,探討2,3-吲哚醌的抗病毒作用。 方法:選擇仙臺病毒(SV)作
2、為病毒研究對象,在雞胚中進行病毒培養(yǎng)、分離,依其生物學(xué)特性選擇乳地鼠腎細胞(BHK-21)細胞作為其感染對象。在細胞培養(yǎng)技術(shù)基礎(chǔ)上通過建立仙臺病毒(SV)感染乳地鼠腎細胞(BHK-21)細胞模型,用細胞效應(yīng)病變(CPE)法觀察2,3-吲哚醌的抗病毒作用以及不同給藥時間對抗病毒作用的影響;同時建立SV感染小鼠模型,通過血凝抑制試驗觀察2,3-吲哚醌對小鼠的免疫功能促進作用以及通過觀察藥物對染毒小鼠死亡率和染毒鼠肺指數(shù)的影響,觀察2,3-吲
3、哚醌對染毒小鼠的保護作用。 結(jié)果:在2,3-吲哚醌對SV的抑制作用實驗中,在39~156μg·ml-1三個劑量組,對SV病毒表現(xiàn)了明顯的抑制作用(P<0.05),IC50為37.61μg·ml-1,TI=11.9,其抑制病毒致CPE的作用隨著藥物劑量的增加而增強。劑量與CPE抑制率之間呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系,表現(xiàn)出劑量-效應(yīng)依賴關(guān)系。相關(guān)系數(shù)r為0.97(P<0.01);在不同給藥時間對病毒抑制的影響實驗中:細胞染毒后0、2、4、6小時
4、加2,3-吲哚醌對病毒致CPE有明顯抑制作用(P<0.01);血凝抑制實驗結(jié)果顯示:與生理鹽水對照組比較,2,3-吲哚醌4mg·ml-1組在接種病毒后7天采血(P<0.01)和14天(P<0.01)采血均可以促進抗血凝素抗體的產(chǎn)生。2,3-吲哚醌1mg·ml-1組在7天采血時也有效,(P<0.05);在2,3-吲哚醌對病毒感染小鼠死亡率的保護作用實驗中:與病毒對照組比較,2,3-吲哚醌4mg·0.2ml-1、1mg·0.2ml-1劑量組
5、小鼠的平均存活時間均高于生理鹽水對照組,并隨劑量的增加平均存活時間相應(yīng)增加,死亡率降低(P<0.01);在2,3-吲哚醌對病毒感染小鼠肺指數(shù)的影響實驗中:2,3-吲哚醌4mg·0.2ml-1(P<0.01)、1mg·0.2ml-1(P<0.05)劑量組均可降低感染小鼠的肺指數(shù),肺指數(shù)抑制率分別為28.7%,18.2%。 結(jié)論:2,3-吲哚醌具有抗SV病毒作用,具有良好的安全范圍,不僅抑制病毒對細胞膜的穿透,而且對病毒的復(fù)制增殖也
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