中國(guó)先天性心臟病患者TBX1基因突變的研究.pdf

1、目的：22q11.2微缺失綜合征（22q11.2 deletion syndrome，22q11DS）是人類最常見(jiàn)的微缺失綜合征，以心臟畸形、顱面畸形、胸腺發(fā)育不良、低鈣血癥、認(rèn)知和精神異常等為主要表現(xiàn)。其中，心臟畸形因?yàn)檩^高的發(fā)生率以及作為致死的主要原因受到研究者的重視。近年的研究表明，Tbx1是22q11.2微缺失綜合征最重要的候選基因，其在心血管發(fā)育過(guò)程中起重要作用。我們通過(guò)聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)像多態(tài)性(PCR-SSCP)技術(shù)檢測(cè)

2、中國(guó)先天性心臟病患者TBX1基因突變的情況，以探討TBX1基因突變與非綜合征心臟畸形發(fā)生的相關(guān)性。
　　 方法：應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-單鏈構(gòu)像多態(tài)性(PCR-SSCP)技術(shù)對(duì)73例先天性心臟病患者和70例健康人樣本的TBX1基因進(jìn)行突變分析。(1)常規(guī)酚氯仿法從73例先天性心臟病患者和70例健康人的外周血中提取基因組DNA；(2)聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)分別擴(kuò)增TBX1基因編碼區(qū)內(nèi)的各個(gè)外顯子；(3)應(yīng)用單鏈構(gòu)像多態(tài)性(SSCP)技術(shù)

3、檢測(cè)PCR產(chǎn)物；(4)對(duì)SSCP發(fā)現(xiàn)改變的PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序；(5)采用χ2檢驗(yàn)確定TBX1核苷酸變異的頻率差異。
　　 結(jié)果：先天性心臟病患者和正常對(duì)照組中均檢測(cè)到928G→A核苷酸變異和933A→G核苷酸變異。73例先天性心臟病患者中存在1例純合928G→A核苷酸變異，8例雜合928G→A核苷酸變異（其中有2例伴有雜合933A→G核苷酸變異），23例純合933A→G核苷酸變異，2例雜合933A→G核苷酸變異（即為上述伴雜合9

4、28G→A核苷酸變異者）。正常對(duì)照組中存在4例雜合928G→A核苷酸變異（其中有2例伴有雜合933A→G核苷酸變異），22例純合933A→G核苷酸變異，2例雜合933A→G核苷酸變異（即為上述伴雜合928G→A核苷酸變異者）。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，928G→A和933A→G核苷酸變異的頻率在先天性心臟病患者和正常對(duì)照組之間均無(wú)顯著性差異(928G→A：χ2=1.89，P＞0.05；933A→G：χ2=2.43×10-5，P＞0.05)。