桂附地黃方多糖質量控制與評價方法研究.pdf

1、多糖廣泛存在于自然界有機體中，是由十個以上單糖通過糖苷鍵連接而形成的大分子化合物，具有能量儲存、結構支持、防御和抗原決定性等多方面的生物功能，有些多糖或其衍生物還有多種藥理活性。目前多糖廣泛應用于醫(yī)藥、保健食品、化工等行業(yè)。對多糖的研究開始于上世紀五十年代，主要集中在多糖藥理活性和化學方面。而多糖質量控制研究至今較少，并且手段單一，主要通過控制多糖含量和分子量分布來實現(xiàn)。這些方法由于自身的局限性和缺陷，無法對多糖實現(xiàn)有效的質量控制。

2、 本課題組曾對多糖的指紋圖譜進行了初步探索，嘗試了采用控制水解條件對多糖進行部分酸水解，以HPLC方法檢測，獲得指紋圖譜，取得了有意義的結果。而對于一個由提取和初步純化得到的粗多糖部位，其單糖組成也會在一定程度上反映多糖的質量特點?；谶@樣的認識，我們進而提出“多糖水解-衍生化-HPLC指紋圖譜”的研究思路，建立多糖質量控制的新方法。 本研究以桂附地黃方多糖作為研究對象，對其多糖部位進行全水解，用1-苯基-3甲基-5-吡啶啉

3、酮(PMP)對全水解產物進行衍生化，以HPLC法，在波長250nm處檢測衍生化產物，得到反映多糖的單糖組成信息的指紋圖譜。以標準單糖為對照，對獲得的指紋圖譜中的八個特征峰進行了指認，分別為甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、木糖和阿拉伯糖。 采用以上建立的方法，獲得了10個批號不同來源的桂附地黃丸多糖的指紋圖譜，并結合中藥相似度軟件和主成分分析法對圖譜進行了比較。結果表明，通過相似度計算，10批產品的相似度均

4、在0.99以上。而在主成分分析法的投影圖中，不同批次產品被聚為3類，顯示了每批產品的指紋圖譜中對總峰面積貢獻較大的單糖在量上存在著一定的差別。 為了進一步驗證方法的適用性，我們將缺味桂附地黃方、不同產地單味藥材組成的桂附地黃方與標準桂附地黃方多糖的指紋圖譜進行了比較，并以相似度軟件和主成分分析軟件分析。結果顯示，熟地黃、山茱萸的缺失對指紋圖譜的影響較大，其他藥材的缺失則影響較小，而單味藥材由于產地不同對指紋圖譜的影響也各不相同。