黃芫花質(zhì)量控制方法與標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、黃芫花為瑞香科植物河朔蕘花Wikstroemia Chamaedaphne Meisn的干燥葉及花蕾。產(chǎn)于河北、山西與河南等地。始載于《圖經(jīng)本草》，《中華本草》及《本草綱目》等著作中亦有記載和論述，收載于《山西省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》1987年版和《中國(guó)藥典》1977年版一部。黃芫花中含有二萜原酸酯類、黃酮類、木質(zhì)素類和甾醇類等成分，具有瀉下逐水的功效，同時(shí)可用于治療水腫脹滿，痰飲咳喘，急、慢性肝炎，精神分裂癥和癲癇等疾病。本研究對(duì)黃芫花藥材進(jìn)行

2、性狀、顯微、薄層鑒別，對(duì)水分、總灰分、酸不溶性灰分進(jìn)行檢查，對(duì)醇溶性浸出物及有效成分木犀草素進(jìn)行含量測(cè)定，為黃芫花藥材質(zhì)量控制提供依據(jù)。在此基礎(chǔ)上對(duì)12批黃芫花藥材進(jìn)行了HPLC-UV指紋圖譜分析，有助于黃芫花藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的提高。芫花系瑞香科植物芫花Daphne genkwa Sieb.et Zucc的干燥花蕾，與黃芫花相似而略大，芫花與黃芫花藥理作用相似，均可用于治療水腫脹滿以及痰飲等癥。本研究建立了液質(zhì)聯(lián)用（HPLC-MS/MS）方

3、法同時(shí)測(cè)定黃芫花與芫花中13種黃酮和3種酚酸類成分的含量，用來評(píng)價(jià)與比較不同產(chǎn)地的16批黃芫花與11批芫花藥材質(zhì)量，為黃芫花與芫花的質(zhì)量控制及臨床應(yīng)用提供依據(jù)。本研究分為三個(gè)部分：
　　第一部分：黃芫花質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。
　　目的：建立黃芫花質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，有效控制黃芫花藥材質(zhì)量。
　　方法：通過查閱文獻(xiàn)對(duì)黃芫花本草進(jìn)行考證，對(duì)12批供試品進(jìn)行性狀鑒別、顯微鑒別、薄層鑒別，測(cè)定12批供試品中水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物含量

4、，同時(shí)建立測(cè)定黃芫花中木犀草素的含量方法。
　　結(jié)果：確定了黃芫花基源；總結(jié)了黃芫花性狀和粉末顯微鑒別特征；建立了具有良好專屬性及耐用性的薄層色譜鑒別方法；水分測(cè)定結(jié)果為6.69％-9.61%，平均值為8.21%；總灰分測(cè)定結(jié)果為4.75%-7.48%，平均值為6.25%；酸不溶性灰分測(cè)定結(jié)果分別為0.38%-1.27%，平均值為0.63%；醇溶性浸出物測(cè)定結(jié)果為25.61%-33.76%，平均值為29.03%。木犀草素測(cè)定結(jié)果為

5、0.011%-0.050%，平均值為0.033%。
　　結(jié)論：建立了黃芫花質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，方法可靠、專屬，為有效控制黃芫花質(zhì)量提供了依據(jù)。
　　第二部分：黃芫花高效液相色譜指紋圖譜研究。
　　目的：建立黃芫花HPLC-UV指紋圖譜分析方法，并與不同產(chǎn)地黃芫花藥材指紋特征相比較，為科學(xué)評(píng)價(jià)與有效控制黃芫花藥材質(zhì)量提供新方法。
　　方法：采用HPLC-UV法測(cè)定了15批黃芫花藥材及黃芫花對(duì)照藥材，色譜條件為Di-amons

6、ilTM C18柱（250 mm×4.6 mm，5μm）；流動(dòng)相為乙腈（A）和0.1%甲酸水溶液（B），梯度洗脫，0-5 min，10%A；5-30 min，10%-20%A；30-45 min，20%-30%A；45-60 min，30%-65%A；60-65 min，65%A，流速為0.8 mL/min，柱溫30℃。
　　結(jié)果：建立了黃芫花指紋圖譜共有模式，得到16個(gè)共有峰，其中3個(gè)色譜峰被指認(rèn)，不同產(chǎn)地黃芫花藥材相似度均大于

7、0.888。
　　結(jié)論：該方法簡(jiǎn)便、可靠，為黃芫花藥材的質(zhì)量控制提供有效手段。
　　第三部分：基于液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的黃芫花與芫花主要化學(xué)成分含量的比較研究。
　　目的：建立LC-MS/MS方法同時(shí)測(cè)定黃芫花及芫花藥材中13種黃酮和3種酚酸類成分，并通過聚類分析對(duì)二者進(jìn)行分類。
　　方法：采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)（MRM）模式，ESI源，負(fù)離子模式檢測(cè)。色譜柱為Agilent C18柱（150 mm×4.6 mm，5μm），流動(dòng)

8、相為甲醇-0.1%甲酸酸水溶液，梯度洗脫，流速0.8 mL/min，進(jìn)樣量10μL。運(yùn)用所建立的方法對(duì)16批黃芫花及11批芫花進(jìn)行了含量測(cè)定，運(yùn)用聚類分析對(duì)不同來源的黃芫花及芫花的藥材進(jìn)行分類比較。
　　結(jié)果：16種化學(xué)成分具有良好的線性關(guān)系，精密度、準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性均符合要求，平均加樣回收率為94.2%-103.8%。黃芫花與芫花藥材中木犀草素與山奈酚的平均含量相近，其余成分含量差異均較大。
　　結(jié)論：本法簡(jiǎn)便、靈敏度高、專