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文檔簡介
1、目的:本課題探討降鈣素基因相關肽(CGRP)對血管平滑肌細胞增殖的影響,為闡明神經因素與平滑肌細胞增生調控之間的關系提供理論依據(jù)。 方法:取五個月胎齡水囊引產人胚胎的主動脈,體外原代培養(yǎng)血管平滑肌細胞,用α-SM-actin免疫細胞化學染色鑒定細胞純度。實驗分為A:聯(lián)胺誘導組;B:聯(lián)胺+CGRP組;C:CGRP組;D:正常對照組。CGRP和聯(lián)胺的作用濃度分別為2×10-Tmol/L和5×10-6mol/L。用細胞計數(shù)法、MTT法檢
2、測細胞增殖,RT-PCR法檢測細胞周期蛋白D1、E和基質金屬蛋白酶抑制劑-2(TIMP-2)mRNA的表達,流式細胞儀法檢測細胞周期的變化。 結論:1、人胚胎血管平滑肌細胞原代培養(yǎng)通過α-SM-actin免疫細胞化學染色鑒定,純度可達98%以上。細胞生長的第3-5天是細胞生長的對數(shù)期。2、聯(lián)胺作為巰基氧化劑可作為血管平滑肌細胞增殖的誘導劑。3、CGRP對血管平滑肌細胞的增殖有下調作用,特別對聯(lián)胺誘導增生的平滑肌細胞作用更明顯,提示
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