非布索坦對(duì)鼠平滑肌細(xì)胞增殖與遷移的影響.pdf

1、血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)的異常增殖與遷移在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展過程中起著十分重要的作用?；钚匝酰≧OS）是刺激血管平滑肌細(xì)胞增殖與遷移的一個(gè)重要因素。非布索坦(Fx)是一種新型的黃嘌呤氧化酶(XO)抑制劑，它可通過抑制黃嘌呤氧化酶的活性抑制活性氧的產(chǎn)生。然而，非布索坦在血小板源性生長因子(PDGF)介導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞增殖與遷移方面的影響尚不清楚。
　　目的:本研究的目的在于觀察非布索坦在PDGF介導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖與遷移方面的

2、影響。
　　方法:選取180-200g雄性SD大鼠，分離大鼠胸主動(dòng)脈，采用組織塊貼壁法得到4-5代的血管平滑肌細(xì)胞，將上述細(xì)胞分別分為以下4組，control組、PDGF組、PDGF+ XO組、PDGF+ XO+ Fx組，而PDGF+ XO+ Fx組又可按Fx濃度不同分別PDGF+XO+Fx(1μM)、PDGF+XO+Fx(5μM)、PDGF+XO+Fx(10μM)組，PDGF+ XO組和PDGF+ XO+ Fx組先給予含相同濃度

3、的XO(5mU/ml)及不同濃度的Fx（1μM、5μM、10μM）的培養(yǎng)基孵育24h，24h后換用含相同濃度PDGF(20ng/nl)的培養(yǎng)基繼續(xù)孵育24h。采用CCK-8方法觀察細(xì)胞的增殖情況，采用transwell方法觀察細(xì)胞的遷移情況，采用流式細(xì)胞學(xué)方法觀察細(xì)胞周期的變化情況，采用Western Blot方法觀察細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白的表達(dá)情況及PDGF信號(hào)通路的變化。
　　結(jié)果:1.在給予PDGF、XO刺激后，PDGF+XO（0

4、.964±0.049）組的增殖能力與control組（0.538±0.074）相比明顯增強(qiáng)，P＜0.05;在給予不同濃度非布索坦（1μM、5μM、10μM、20μM）刺激后，其增殖能力逐漸減弱，呈劑量依賴型關(guān)系，且PDGF+ XO+ Fx（10μM）組（0.573±0.055）的增殖能力與PDGF+XO（0.964±0.049）組相比減弱最明顯，P＜0.05。2.在給予PDGF、XO刺激后，PDGF+XO組（37.6±4.8）遷移細(xì)胞數(shù)

5、與control組（9.6±2.2）比明顯增多，P＜0.05;而給予非布索坦刺激后，PDGF+ XO+ Fx組（14.4±2.1）遷移細(xì)胞數(shù)與PDGF+XO組（37.6±4.8）相比明顯降低，P＜0.05。3.在給予PDGF、XO刺激后，PDGF+ XO組細(xì)胞周期S期的比例（19.70±1.21％）較control組（8.49±1.50％）明顯升高，P＜0.05;而給予非布索坦刺激后，PDGF+ XO+ Fx組的S期比例（12.10±1

6、.73％）較PDGF+ XO組（19.70±1.21％）明顯下降，P＜0.05。4.在給予PDGF、XO刺激后，PDGF+ XO組細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白(cyclin D1，CDK4，cyclinE and CDK2)的表達(dá)較control組明顯升高，而這一現(xiàn)象可被非布索坦所抑制，且呈劑量依賴型關(guān)系。5.非布索坦在可明顯抑制PDGF介導(dǎo)的pAkt和pERK1/2的升高，且呈劑量依賴型關(guān)系。
　　結(jié)論:1.非布索坦可抑制PDGF介導(dǎo)的血管