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1、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文玉米大斑病菌鈣調(diào)磷酸酶B亞基基因的克隆與功能分析姓名:劉艷梅申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):植物學(xué)指導(dǎo)教師:韓建民董金皋20080606CloningandFunctionalAnalysisoftheCalcineurinBGeneinSetosphaeriaturcicaAuthorLIUYahrodSupervisors:HANJianmin,DONGJingaoMajorBotanyAbstractCalcine
2、ufinisaconservedCa2/calmodulinactivatedserine/threoninespecificprotainphosphatasethatplaysallimportantroleintheregulaticnofmorphogenesisandpathogenesisinvariousfungiInthisworkCnBgenewasclonedandidentifiedfromSetosphaeria
3、turcica,thenstudiedanddeduceditsrolesin&turcicadevelopmentbyadvantageofantisenseinhibitionexpressionmethodandbioinformaticsanalysisItisthefirsttimeforUStoisolatethecompletedeDNAsequenceandDNAsequenceofCnBgenefrom&turcica
4、llsingRACEmethod,andpredictthecorrespondingstructureandfunctionsbythebioinformaticsoftwareTheresultsshowedthatCnBgenehad4exonsand3intronsandthelargestopenreadingframeWas525bpwhichencodedaproteinof174aminoacidresiduesTheC
5、nBgeneof&turcicahadfour“EFhand’calciumbindingregions,andshowed90%homologywimCnBgenesfrom只nodorum,BcinereaandNeurosporacrassaPredicted3DstructureforCnBproteinbySwissmodel,wascomtimtedwith8helixesand4turns,forming4‘helixes
6、loophelixes’’regionsThestructurecharacteristicwasconsistentwimCnBfour“EFhand’calciumbindingregionsA2kbgeneflankregionWasobtainedbyGenomicWalkingBioinformaticanalysisshowedthatithadalotofcis—actingdementscorrespondingGbox
7、,DETl,CDAI,HSF,butnotypicalTATAboxWecalculatedthatCnBgeneperhapsplaysanimportantroleintheregulationofcellmorphogenesis,hottoleranceandlightsignalconductionTheresultofSouthemblottingshowedthatCnBWassinglecopyinthegenomeof
8、SturcicaThesenseorantisenseCnBgeneexpressioninductionvectorswereconstructedbasedontheplasmidpSOIthentransformedinto&turcicaprotoplastand5antisenseCnBgenewhichhphgeneinsertedwerescreenedfrom23transformantsTwotransformants
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