白色鏈霉菌產(chǎn)生天然防腐劑多聚賴氨酸的研究.pdf

1、e-多聚賴氨酸是目前天然防腐劑中具有優(yōu)良防腐性能和巨大商業(yè)潛力的微生物類食品防腐劑。迄今為止，e-多聚賴氨酸的微生物發(fā)酵在日本己實(shí)現(xiàn)工業(yè)化，年產(chǎn)千噸e-多聚賴氨酸的現(xiàn)代化工業(yè)裝置已建成投產(chǎn)。但e-多聚賴氨酸微生物發(fā)酵生產(chǎn)技術(shù)在國內(nèi)還處于實(shí)驗(yàn)室階段， e-多聚賴氨酸生物防腐劑的開發(fā)和生產(chǎn)還屬空白，因此，開展e-多聚賴氨酸生產(chǎn)技術(shù)的研究具有重要意義。 本課題對(duì)從土壤中自行分離獲得的供試菌株1-25進(jìn)行種屬鑒定，優(yōu)化其培養(yǎng)和發(fā)酵條件，

2、同時(shí)研究該菌株發(fā)酵獲得的抑菌產(chǎn)物的相關(guān)性質(zhì)，并對(duì)該抑菌產(chǎn)物進(jìn)行鑒定，為進(jìn)一步選育高產(chǎn)菌株和豐富防腐劑種類奠定基礎(chǔ)。 S.albulusl-25在酵母膏-麥芽粉培養(yǎng)基生長速度最快、菌落密集，確定為最佳固體培養(yǎng)基。采用光電比濁法測(cè)定S.albulusl-25菌株的生長曲線，結(jié)果表明，0～12h為延遲生長期，12～36h為對(duì)數(shù)生長期，36～60h為穩(wěn)定生長期，培養(yǎng)64h后進(jìn)入衰退期。 通過正交實(shí)驗(yàn)分析得出，S．a(chǎn)lbulusl

3、-25 的種子培養(yǎng)基的優(yōu)化結(jié)果為：5％淀粉，0.25％的含氮量的蛋白胨．0.004％ZnSO<,4>·7H<,2>O，0.05％ MgSO<,4>·7H<,2>O，0.003％MnSO<,4>，0.272％ KH<,2>PO<,4>，0.716％Na<,2>HPO<,4>·12H<,2>O;發(fā)酵培養(yǎng)基優(yōu)化結(jié)果為：5％甘油， 1.5％硫酸銨，0.6％酵母膏，0.004％ZnSO<,4>·7H<,2>O，0.05％MgSO<,4>·7H<,

4、2>O，0.003％FeSO<,4>，0.272％ KH<,2>PO<,4>，0.716％Na<,2>HPO<,4>·12H<,2>O。 S.albulusl-25經(jīng)發(fā)酵產(chǎn)生的抑菌物質(zhì)經(jīng)茚三酮反應(yīng)和雙縮脲反應(yīng)可初步判斷為蛋白質(zhì)或多肽類物質(zhì)。經(jīng)氨基酸自動(dòng)分析儀檢測(cè)確定其活性組分為多聚賴氨酸。多聚賴氨酸提取物經(jīng)Tricine-甘油SDS-PAGE超低分子量電泳可得到單一條帶，分子量約為13,000左右。 多聚賴氨酸提取物為易

5、溶物質(zhì)：熱穩(wěn)定性高，120℃加熱50min仍具有較好的抑菌活性；pH值適用范圍廣泛：對(duì)蛋白酶不敏感，其抑菌活性不易受胃蛋白酶、胰蛋白酶的影響，木瓜蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對(duì)其抑菌活性有部分影響，但未使之完全失去抑菌活性。抑菌譜實(shí)驗(yàn)表明，多聚賴氨酸提取物抑菌范圍廣，對(duì)包括食品腐敗菌和致病菌在內(nèi)的許多革蘭氏陽性菌Bacillus megaterium、Listeria sp.Salmonella sp．Proteus vulgaris、Shig