溫度、高效氯氰菊酯對東亞小花蝽(Orius sauteri)捕食功能及體內HSPs的表達水平影響.pdf

1、東亞小花蝽（Orius sauteri）是田間重要的捕食性天敵昆蟲之一，本研究室多年監(jiān)測大豆田天敵昆蟲發(fā)生情況的結果表明，在東北地區(qū)，小花蝽具有發(fā)生早、田間控制害蟲時間長的特點，是早期控制薊馬、蚜蟲的主要天敵，是一類很有利用價值的天敵昆蟲。目前，我國在農事操作、田間管理過程中，由于化學農藥的施用，大大影響了小花蝽固有的的生物防治效果。為了更好的減少農藥的使用，降低環(huán)境危害，本文著重研究了田間外界因素對東亞小花蝽的捕食功能與體內抗逆蛋白表

2、達水平的影響，為更好的利用天敵昆蟲進行生態(tài)農業(yè)提供參考。
　　本研究選取東亞小花蝽成蟲為供試材料，對其于不同溫度、不同農藥梯度下捕食量情況、種內競爭捕食功能參數等進行分析研究，并通過提取蟲體總RNA、利用RT-PCR和RACE技術，克隆得到熱休克蛋白基因hsc70、hsp70、hsp90基因全長，經原核表達及Western-blot驗證了克隆基因的正確后，采用Real-time PCR技術，分析了在不同溫度(10℃、18℃、26℃

3、、34℃、42℃)下、不同高效氯氰菊酯濃度(CK、LC25、LC50、 LC75)下，及這兩種因子共同脅迫作用下，對東亞小花蝽體內hsc70、hsp70、hsp90的表達量水平影響。通過試驗分析確定了東亞小花蝽最適捕食溫度為26℃，東亞小花蝽成蟲處理一頭大豆蚜所需的時間(Th)以26℃時最短(0.0549 d)，18℃時最長(0.1155 d);捕食上限以26℃時最大（18.2頭），18℃時最?。?.65頭）;瞬間攻擊率(a)以26℃時

4、最大(1.3122)，34℃時最小(0.6160)。在供試農藥濃度梯度范圍內，東亞小花蝽成蟲處理一頭大豆蚜所需的時間(Th)以0 mg/L時最短(0.0549d)，140 mg/L時最長(0.15 d)，其中在農藥梯度在40 mg/L下時，處理一頭大豆蚜所需的時間(Th)為0.0824 d，是0mg/L的1.5倍;捕食上限40 mg/L下為12.1359，約是0mg/L的2/3，且隨著農藥濃度的增加捕食上限也大幅度下降;農藥脅迫下，40

5、 mg/L下為0.3845，約是0 mg/L的2/7，且隨著農藥濃度的增加瞬間攻擊率(a)也大幅度下降。
　　本研究獲得了hsc70、hsp70、hsp90基因全長分別2207 bp、2286 bp、2433 bp，GeneBank登錄號分別為:KJ573768、KJ867518、KJ573769。預測分子量為71.57 KDa、69.82 KDa、83.05KDa，與SDS-PAGE及Western-blot所得結果相吻合。Re

6、al-time PCR結果表明，在供試溫度梯度下，hsc70表達量顯著升高，分別是26℃的7～23倍，其各處理之間差異顯著(P＜0.05);hsp70表達量也顯著升高，最高可達到26℃的38.69倍。當溫度升高或降低波動較范圍較小時，東亞小花蝽體內hsc70、hsp90表達量上調倍數比hsp70表達量大，而當環(huán)境溫度升高或降低波動劇烈時，其體內的hsp70表達量比hsc70、hsp90更容易被誘導升高，表現為hsp70表達水平是26℃下

7、的30～40倍。在供試農藥處理梯度下，以LC25濃度處理蟲體與對照組相比較，hsc70大量表達，而hsp90表達量下降;10℃，42℃下，農藥處理抑制的hsp70轉錄，表達量水平下降;隨著農藥濃度的增加hsp70、hsp90表達量顯著升高，而hsc70表達量下降。本試驗結果說明東亞小花蝽對一定溫度范圍內對高溫、低溫具有抗逆性，然而農藥的施用會降低其體內抗逆蛋白HSPs的表達，從而降低了對不良自然環(huán)境的適應，影響其正常的生物防治效果。因此