電穿孔介導(dǎo)的基因治療對下頜骨牽引成骨影響的初步研究.pdf

1、瀘州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文電穿孔介導(dǎo)的基因治療對下頜骨牽引成骨影響的初步研究姓名：黎德平申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：郭力;吳國平20090401瀘州醫(yī)學(xué)院碩士研究生學(xué)位論文別于注射后1 天、3 天、7 天、1 4 天處死動物，切取牽引區(qū)組織約0 ．4 c m x 0 ．4 c m 大小，進行組織學(xué)檢查、電鏡觀察，C D 3 4 免疫組織化學(xué)染色進行微血管密度( m i c r o v e s s e ld e n s i t y

2、 ，M V D ) 檢測。結(jié)果：電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，A 、B 組血管內(nèi)皮細胞呈增殖活躍狀態(tài)：細胞呈梭狀，具有多個突起，基底膜完整，胞漿內(nèi)具有豐富的線粒體呈橢圓形或圓形；C 組多數(shù)血管內(nèi)皮細胞部分呈現(xiàn)退變和凋亡早期改變。免疫組化染色發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)染后第1 天血管壁內(nèi)皮細胞漿C D 3 4 表達較弱；第3 ～1 4 天，牽引區(qū)肉芽組織血管內(nèi)皮細胞均出現(xiàn)C D 3 4 陽性表達。B 組C D 3 4 陽性表達較C 組強，A 組C D 3 4 陽性表達較B

3、 組強，C 組最弱( P < O ．0 5 ) ，各組各時間點差異顯著( P < 0 ．0 5 ) 。比較施加電穿孔的A 組、C 組和未施加電穿孔的B 組，A 組、B 組的C D 3 4 表達持續(xù)陽性且呈上升趨勢，而C 組C D 3 4 陽性表達維持在第1 天C D 3 4 陽性表達水平上平穩(wěn)波動。結(jié)論：電脈沖介導(dǎo)的p l R E S —h V E G F l 6 5 一E G F P 重組質(zhì)粒體內(nèi)轉(zhuǎn)染能夠促進牽引區(qū)早期微血

4、管的生成，使局部血管增生、滲入，增加骨斷端的血流量。提示其有刺激骨基質(zhì)合成和誘導(dǎo)細胞增殖分化等活性功能，從而對調(diào)節(jié)和促進骨的生長和修復(fù)過程具有重要作用。第二部分：電穿孔介導(dǎo)的基因治療對下頜骨牽引成骨影響的初步研究目的：探索電穿孔介導(dǎo)的基因治療對下頜骨D o 過程中牽引間隙新骨生成的影響，從而為促進下頜骨D O 新骨牛成，縮短牽引周期，減少并發(fā)癥提供新思路。方法：選用新西蘭大白兔5 0 只，沿雙側(cè)下頜骨邊緣切開皮膚，鈍性分離附著下頜骨的肌

5、肉，暴露下頜骨。于下頜骨頦孔處，用微型電動鉆截開下頜骨，于下頜骨斷開處安放2 c m 牽引器，固定，逐層縫合組織。于術(shù)后3 天開始牽引，每天0 ．8 m m ，連續(xù)牽引7 天后，將兔隨機分為5 組：A M ：在牽引區(qū)注射2 肛g ( 0 ．1 p ∥山) 重組質(zhì)粒p I R E S - h V E G F l 6 5 一h B M P 2 。B 組：在牽引區(qū)注射2 H g ( 0 ．1 l x g ／I - t 1 ) 重組質(zhì)粒p l