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文檔簡介
1、本研究將大白菜高抗軟腐病自交系A32-2和高感軟腐病自交系A19-2進行雜交,用獲得的F2代225個單株作為構建遺傳圖譜的作圖群體,通過SRAP分子標記方法的遺傳分析,構建了大白菜抗軟腐病分子遺傳圖譜;并進行了與大白菜抗軟腐病性狀有關的QTL定位。為建立大白菜軟腐病抗性育種分子標記輔助選擇系統(tǒng)奠定基礎。研究結果表明: 1.本試驗采用大白菜軟腐病快速鑒定方法,對親本A32-2、A19-2、F1及F2代進行抗病接種鑒定分析。經鑒定表
2、明,兩親本間抗、感差異明顯,母本均表現(xiàn)抗病,父本均表現(xiàn)感病:F1表現(xiàn)抗??;F2代抗性分離,其中0級21株,1級60株,3級75株,5級43株,7級16株,9級10株,共225株。根據(jù)F2代病情分級和各病級的株數(shù)制作了二維分布圖及利用SAS8.2univariate程序進行偏度、峰度檢驗,偏度參數(shù)為0.8484,峰度參數(shù)為0.1358。說明病情株數(shù)呈正態(tài)分布,符合數(shù)量性狀特點。 2.本試驗對SRAP-PCR反應條件進行了優(yōu)化,建立
3、了一套適合于本試驗的反應條件,對Mg2+、dNTP、Taq酶、引物、模板DNA分別做了濃度梯度試驗,最后確定總體積25μl的優(yōu)化反應體系為::Mg2+濃度3.0mmol/L、dNTP濃度0.3mmol/L、Taq酶1.5U、引物濃度0.2μmol/L,、模板DNA60ng。 3.通過對F2群體SRAP分析,得到了139個SRAP多態(tài)性位點,經Mapmaker/EXP3.0軟件處理,構建了包含10個連鎖群,由103個遺傳標記組成的
4、大白菜抗軟腐病分子遺傳圖譜。該圖譜覆蓋長度為1223.6cM,平均圖距11.9cM。每個連鎖群上的標記數(shù)在4~25之間,標記間最大間距為33.1cM,最小間距為2.2cM,連鎖群長度在40.5~348.0cM之間。 4.進行F2代分子標記,采用Mapmaker3.0軟件進行分析,以最大圖距50cM作為劃分連鎖群和排列markers的基準距離。并用WINQTLCart2.5進行作圖,采用復合區(qū)間作圖法,共檢測到4個大白菜軟腐病抗性
5、基因的QTLs位點。QE1,QE2位于第2連鎖群上,加性效應分別為9.17和10.56,可以解釋的表型變異分別為14.23%和22.73%;QE3位于第6連鎖群上,加性效應為5.24,可以解釋的表型變異為9.33%;QE4位于第7連鎖群上,加性效應為4.35,可以解釋的表型變異為8.52%。 實驗結果表明,大白菜軟腐病Ecc-1-1抗性為連續(xù)分布且4個QTLs位點不能解釋Ecc-1-1全部的表型變異,說明大白菜抗.Ecc-1-1
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