我國西南地區(qū)免疫接種后兒童乙肝隱匿性感染的研究.pdf

1、目的：調查我國西南地區(qū)父親和/或母親為乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）陽性的HBsAg陰性兒童乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）疫苗接種后乙型肝炎病毒隱匿性感染（Occult Hepatitis B Virus Infection，OBI）的發(fā)生率，進行基因變異分析并探討OBI發(fā)生的相關因素，為免疫接種后兒童OBI的流行病學研究奠定基礎。
　　方法：采集由父

2、親和/或母親為HBsAg陽性的HBsAg陰性且接受過乙肝疫苗免疫的兒童血清標本211份。血清學檢測由商品化化學發(fā)光法（chemiluminescent microparticle immunoassay，CMIA）試劑盒完成。排除年齡小于8m或乙肝疫苗全程免疫接種記錄不清的兒童，針對HBV基因組Surface區(qū)、Pre-S區(qū)、Core/pre-core區(qū)及X區(qū)利用巢式PCR（nested PCR）檢測血清中的HBV DNA，擴增產(chǎn)物純化

3、后測序并進行基因變異分析，2個或者2個以上區(qū)陽性的樣本為 OBI陽性。進一步利用熒光定量 PCR（Real-time PCR）進行HBV DNA定量，同時收集了患兒出生史、喂養(yǎng)史等臨床資料，分析OBI在該人群中的感染流行及相關因素。
　　結果：共有186名患兒最終納入本研究。我國西南地區(qū)父親和/或母親HBsAg陽性的HBsAg陰性兒童乙肝疫苗免疫接種后OBI的發(fā)生率為4.3％（8/186）。在8名OBI的患兒中，6名患兒的父親為H

4、BV感染者，2名患兒的母親為HBV感染者。通過標準株比對，基因進化樹及NCBI分型工具分析發(fā)現(xiàn)8例患兒中2例為C基因型，其中1例血清型adrq-，另1例血清型未知。3例B基因型及3例B、C基因型共同感染均為血清型adw2。2例被發(fā)現(xiàn)存在抗原決定簇‘a(chǎn)’的逃逸突變且其中P77 HBV DNA水平與顯性感染相當，因此被認為是“假OBI”。另發(fā)現(xiàn)出位于主要親水區(qū)（major hydrophilic region，MHR）的多個突變。注射乙肝免

5、疫球蛋白（hepatitis B immune globulin，HBIG）不會降低OBI的發(fā)生率。母乳喂養(yǎng)及順產(chǎn)并非OBI的危險因素，母乳喂養(yǎng)可能促進保護性抗體的產(chǎn)生。OBI患兒血清谷丙轉氨酶（alanine aminotransferase，ALT）及谷草轉氨酶（aspartate transaminase，AST）水平未見明顯異常。
　　結論：OBI存在于父親和/或母親HBsAg陽性的乙肝疫苗免疫接種后兒童中。HBV S區(qū)的