白色念珠菌熱休克蛋白90核酸疫苗的構(gòu)建及其免疫學(xué)活性研究.pdf

1、核酸疫苗(DNA vaccine)是指將含有編碼某種抗原蛋白的外源基因序列插入到質(zhì)粒載體中，該重組質(zhì)粒就稱為核酸疫苗。核酸疫苗又稱為基因疫苗。核酸疫苗是繼病原體疫苗、亞單位疫苗之后出現(xiàn)的第三代疫苗，與傳統(tǒng)的疫苗相比具有多價、高效、價廉、安全等許多優(yōu)勢。
　　白色念珠菌(Candida albicans)是一種寄生在動物和人的口腔和胃腸道的條件致病菌，它可以在機(jī)體免疫力下降和正常菌群失調(diào)時作為機(jī)會病原體，引起機(jī)體的淺層感染（也稱粘膜

2、性感染）和系統(tǒng)性感染（也稱深層感染或全身性感染）。系統(tǒng)性白色念珠菌感染危害巨大，據(jù)科學(xué)家統(tǒng)計(jì)，在使用了抗真菌藥物后，該病的死亡率仍高達(dá)70％以上。隨著發(fā)病率和致死率的不斷增加，越來越多的科學(xué)工作者投入到白色念珠菌免疫學(xué)機(jī)制的研究中。
　　英國曼徹斯特醫(yī)學(xué)院的Matthews等人長期從事白色念珠菌免疫學(xué)方面的研究，他們發(fā)現(xiàn)在系統(tǒng)性白色念珠菌感染中熱休克蛋白90(Hsp90)起著主要的病理學(xué)作用。并確定了Hsp90的抗原表位圖譜，發(fā)現(xiàn)

3、了2個能夠與病人血清起反應(yīng)的常見表位，即表位C和H，表位C是一種保守表位，能夠與所有病人的血清起反應(yīng);表位H是白色念珠菌所特有的一種表位，它能夠被大約50％的病人血清識別。
　　本實(shí)驗(yàn)選擇了Hsp90全基因序列中含有編碼C、H表位的一段DNA序列，構(gòu)建了核酸疫苗pcDNA3.1/Hsp90。通過肌肉注射后電轉(zhuǎn)(electroporation)的方式免疫小鼠，Western blot結(jié)果表明:經(jīng)熱休克蛋白90重組質(zhì)粒(pcDNA3.