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文檔簡介
1、目的:
1.股骨干骨折、腦損傷、股骨干骨折合并腦損傷三種不同創(chuàng)傷模型對大鼠肺臟Ⅱ型細胞超微結(jié)構(gòu)的影響。
2.股骨干骨折、腦損傷、股骨干骨折合并腦損傷三種不同創(chuàng)傷模型對大鼠肺臟SP-A的影響。
3.股骨干骨折、腦損傷、股骨干骨折合并腦損傷三種不同創(chuàng)傷模型肺臟局部炎癥介質(zhì)與Ⅱ型細胞超微結(jié)構(gòu)和SP-A變化的相關(guān)性研究。
材料和方法:
1.自制大鼠股骨干閉合骨折和腦損傷打擊器
2、,用300g左右Sprague-Dawley大鼠造模。實驗分為對照組、股骨干閉合骨折組、腦損傷組、股骨干閉合骨折合并腦損傷組,各組分別在1、6、12、24小時等時間點處死取樣。電鏡取材前用多聚甲醛灌注,取材部位為右肺下葉,切成1mm3小塊若干,放入電鏡專用固定液(北京神經(jīng)外科研究所提供)4℃保存,用于透射電子顯微鏡檢查。檢查炎癥介質(zhì)和SP-A為未灌注,取材部位分別為右肺下葉,肺組織標記后凍存于液氮中,提取上清液后轉(zhuǎn)至-80℃冰箱中保存,
3、用于SP-A和TNF-α、IL一6、IL-10的檢測。
2.透射電子顯微鏡觀察肺組織ACE-Ⅱ超微結(jié)構(gòu)的病理變化,采用WesterBlot法半定量測定肺組織SP-A蛋白的含量,采用Elisan檢測肺組織中的TNF-α、IL-6、IL-10的含量。用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包進行統(tǒng)計學處理,多組樣本間采用單因素方差分析。
結(jié)果:
1.ACE-Ⅱ?qū)?chuàng)傷較敏感,嚴重創(chuàng)傷會引起其凋亡。
2
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