LP17對大鼠腸巨噬細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響.pdf

1、目的:通過觀察髓系觸發(fā)受體-1的拮抗劑LP17對體外培養(yǎng)的被激活鼠大腸巨噬細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的變化影響，探討TREM-1對激活的腸巨噬細(xì)胞的作用機(jī)制，尋找對重癥胰腺炎導(dǎo)致的腸粘膜屏障功能障礙的可能治療方法。
　　方法:體外分離、培養(yǎng)鼠大腸巨噬細(xì)胞，把巨噬細(xì)胞分成三組處理:①對照組:未加脂多糖和LP17處理;實驗組:②LPS組:用LPS處理巨噬細(xì)胞;③LPS+LP17組:用LPS+LP17處理巨噬細(xì)胞。給藥濃度:LPS(1mg/L)，LP

2、17(0.1 mg/L)，培養(yǎng)6h后用0.25％胰酶消化收集細(xì)胞。利用RT-PCR檢測試驗中三組巨噬細(xì)胞的TREM-1的基因表達(dá)含量。細(xì)胞樣品經(jīng)2.5％戊二醛前固定2h后，用0.1M PBS清洗數(shù)次，再經(jīng)1％鋨酸后固定1.5 h，0.1M PBS清洗數(shù)次后，乙醇梯度濃度脫水，Epon812樹脂浸透包埋，在60℃恒溫箱聚合成包埋塊后切片。切片厚度為70 nm。Tecnai12透射電鏡觀察實驗組及對照組大鼠腸巨噬細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)變化。