大鼠杏仁體和海馬結(jié)構(gòu)內(nèi)CREB對應(yīng)激刺激的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、杏仁體(amygdala，AM)和海馬結(jié)構(gòu)(hippocampalformation，HF)是與情緒活動和學習記憶相關(guān)的重要結(jié)構(gòu)，AM和HF內(nèi)的轉(zhuǎn)錄因子cAMP反應(yīng)元件結(jié)合蛋白(CREB)在記憶調(diào)節(jié)過程中發(fā)揮了重要作用。CREB的活化形成磷酸化CREB(pCREB)。本實驗進一步探討：①應(yīng)激刺激后AM和HF內(nèi)pCREB表達量的變化；②pCREB在什么神經(jīng)元中表達；③pCREB的表達與NMDA受體活性的關(guān)系。作了如下工作：　　1.對SD

2、大鼠強迫性游泳(FS)，建立情緒性應(yīng)激刺激動物模型，以正常同類大鼠為對照，用免疫細胞化學單標法、蛋白免疫印跡實驗，以抗pCREB抗體觀察檢測pCREB免疫陽性神經(jīng)元在對照組和實驗組大鼠AM各亞核團和HF內(nèi)的分布特征及變化規(guī)律；用免疫細胞化學雙標法和免疫電鏡，以抗pCREB、抗Glu和抗PV抗體，分析了表達pCREB神經(jīng)元的類型。結(jié)果提示，CREB明顯參與了應(yīng)激刺激的神經(jīng)調(diào)節(jié)，且這種調(diào)節(jié)是通過谷氨酸能投射神經(jīng)元而非中間聯(lián)絡(luò)性神經(jīng)元完成的。

3、　　2.分別在FS前24h、6h和1h以慢性腹膜腔內(nèi)注射方式，將谷氨酸的離子型受體-NMDA受體抑制劑MgSO4和ZnSO4引入大鼠體內(nèi)，然后強迫大鼠游泳10min；24h后，再次迫使大鼠游泳5min，此過程稱為強迫性游泳測試(FST)。觀察大鼠在FST過程中的停滯時間(IT)及pCREB免疫陽性細胞核變化。結(jié)果說明，NMDA受體抑制劑使大鼠強迫性游泳的IT時間降低，明顯抑制了DG、CA3區(qū)、BL和LA內(nèi)pCREB免疫陽性物質(zhì)的表達。