妊娠滋養(yǎng)細胞及滋養(yǎng)細胞疾病PTEN和錯配修復基因的啟動子甲基化.pdf

1、浙江大學碩士學位論文妊娠滋養(yǎng)細胞及滋養(yǎng)細胞疾病PTEN和錯配修復基因的啟動子甲基化姓名：朱長錕申請學位級別：碩士專業(yè)：婦產科學（婦科腫瘤）指導教師：謝幸葉大風2002.5.12002年浙江大學碩士學位論文論文異性磷酸酶。PTEN的功能包括：拮抗P13K的作用，對細胞起增殖負調控作用；PTEN抑制細胞遷移、鋪展和局部粘附；PTEN可以顯著下調MMPs、IGFs、VEGF的表達。PTEN活性的改變與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及轉移有著密切關系。

2、PTEN表達缺失的機制包括PTEN基因突變和啟動子甲基化，PTEN啟動子甲基化在部分腫瘤發(fā)生、發(fā)展以及轉移中可能起重要作用。錯配修復系統(tǒng)(MMR)通過修復DNA堿基錯配而確保DNA復制準確性，使遺傳保持穩(wěn)定。到目前為止，在人體中發(fā)現的錯配修復基因主要有hMLHI、hMSH2、hMSH3、hMSH4、hMSH5、hMSH6、hPMSl和hPMS2，其中hMLHl和hMSH2這兩個基因和腫瘤的發(fā)生關系較大。錯配修復基因表達缺失或功能缺陷導致

3、個體細胞遺傳不穩(wěn)定，表現為微衛(wèi)星不穩(wěn)定，突變累積最終引起腫瘤的發(fā)生。錯配修復基因的啟動子在許多腫瘤中有甲基化。根據妊娠滋養(yǎng)細胞、妊娠滋養(yǎng)細胞疾病及PTEN、錯配修復基因的特點，、我們推測在滋養(yǎng)細胞疾病中存在PTEN、hMLHt和hMSH2的啟動子甲基化J本實驗選擇／妊娠滋養(yǎng)細胞和滋養(yǎng)細胞疾病為研究對象，通過甲基化敏感性核酸內切酶Hpall酶切PCR法，觀察PTEN、hMLHI和hMSH2的啟動子的甲基化，旨在探討PTEN、錯配修復基因啟

4、動子甲基化在妊娠滋養(yǎng)細胞發(fā)育以及妊娠性滋養(yǎng)細胞疾病發(fā)生中的意義。，(方法：標本取自本院病理科存檔、確診的部分性葡萄胎25例：完全性葡萄胎33例：侵葡16例：絨癌6例，其中1例繼發(fā)于產后，2例流產后，3例葡萄胎后，侵葡和絨癌術前均未經化療；另收集的足月胎盤35例(3S40W)，正常早孕人流絨毛28例(612W)。甲基化敏感性核酸內切酶Hpall酶切半巢式PCR法分析PTEN、hMLHI、hMSH2的啟動子甲基化。待擴增的啟動子序列內有CC

5、GG序列，可以被HpaII特異性識別，若沒發(fā)生甲基化，則DNA序列被切斷，擴增不出特異性的PCR產物：如果發(fā)生甲基化，C5mCGG不能被HpaII所切斷，可以擴增出特異性的PCR產物。結果：1、早孕絨毛和足月胎盤PTEN、hMLHl、hMSH2啟動子甲基化：PTEN啟動子在早孕絨毛和足月胎盤中有甲基化，分別為179％和114％，無顯著差異(X2=0525，p=0469)；hMLHl和hMSH2啟動子未檢測到甲基化。2、葡萄胎PTEN、h