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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探索鎘染毒對(duì)未成年雄性小鼠生殖系統(tǒng)的損傷及生育能力的影響,為進(jìn)一步研究鎘的生殖毒性積累基礎(chǔ)資料。
方法:96只四周齡SPF級(jí)雄性NIH小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組,低、中、高劑量組,每組24只。按照總劑量分別為0、0.84、1.68、3.36mg Cd/kg體重腹腔注射生理鹽水或氯化鎘(CdCl2)和β-巰基乙醇(ME)的混合溶液(二者濃度比為1∶20),1次/天,連續(xù)5天。給藥結(jié)束后的第30,60,90,120天,各組分
2、別隨機(jī)取6只動(dòng)物,進(jìn)行如下處理:
1.交配能力檢測(cè):將雌雄小鼠按1∶1合籠,雌鼠放入后,記錄雄鼠首次捕捉雌鼠的時(shí)間即捕捉潛伏期及20min內(nèi)雄鼠捕捉雌鼠的次數(shù)。
2.雄鼠生殖毒性檢測(cè):①采血,離心取血清,測(cè)定血清睪酮(T)。②解剖取腦、心、肺、肝、脾、腎、睪丸,測(cè)臟器系數(shù)。③留取右腎、右睪丸和部分肝,用原子吸收光譜儀(AAS)測(cè)定其中的鎘含量。④取右側(cè)附睪觀察精子畸形率。⑤固定肝臟、脾臟、左腎、左睪丸和左附睪
3、進(jìn)行病理檢查。
3.雌鼠交配率和受孕率檢測(cè):將雄鼠與雌鼠按1∶2合籠,發(fā)現(xiàn)陰道栓當(dāng)天記為妊娠第0天(GD0),合籠12d后計(jì)算雌鼠交配率,在GD14,確定成功懷孕雌鼠的數(shù)量,計(jì)算受孕率。
4.胎鼠檢測(cè):每組隨機(jī)取一半受孕雌鼠,于GD17處死取出胎鼠。進(jìn)行一般觀察,并測(cè)量體長(zhǎng)、尾長(zhǎng)及體重。再對(duì)胎鼠分別進(jìn)行骨骼畸形和內(nèi)臟畸形檢查。
5.仔鼠檢測(cè):讓每組另一半受孕雌鼠自然分娩,仔鼠21日齡時(shí)稱重,并觀
4、察性別。
6.窩平均活胎數(shù)統(tǒng)計(jì):對(duì)各批次各組孕鼠的窩平均活胎數(shù)(包括胎鼠和仔鼠)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。
結(jié)果:
1.交配能力檢測(cè)結(jié)果:30,60,90,120d批次染鎘雄鼠的交配能力與對(duì)照組相比未出現(xiàn)顯著變化。
2.雄鼠生殖毒性檢測(cè)結(jié)果:①血清T檢測(cè)結(jié)果:30d,60d,120d批次的1.68、3.36mg Cd/kg組雄鼠的血清T含量顯著低于正常對(duì)照(P<0.05),90d批次的所有染鎘雄鼠
5、血清T含量均顯著低于正常對(duì)照組(P<0.05)。②120d批次的0.84mgCd/kg組肝臟、肺臟,1.68mg Cd/kg組肝臟的臟器系數(shù)較正常對(duì)照組顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。③臟器鎘含量測(cè)定結(jié)果:各批次染鎘雄鼠肝、腎、睪丸鎘含量均顯著高于正常對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。④精子畸形率:各批次染鎘雄鼠精子畸形率與正常對(duì)照組相比,均顯著升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。⑤臟器病理檢查結(jié)果:染鎘動(dòng)物腎臟
6、病理變化主要以間質(zhì)炎細(xì)胞浸潤(rùn),腎小管上皮細(xì)胞變性,慢性腎盂腎炎為主。肝臟的病理改變主要有:局灶性炎細(xì)胞浸潤(rùn),肝臟髓外造血,肝細(xì)胞核腫脹等。脾臟也出現(xiàn)了髓外造血。睪丸的病理改變主要以部分生精小管萎縮,部分動(dòng)物睪丸組織壞死為主。附睪的病理改變主要有:附睪管內(nèi)精子消失,部分附睪管內(nèi)可見(jiàn)脫落生精細(xì)胞。
3.雌鼠交配率和受孕率檢測(cè)結(jié)果:各批次染鎘組雌鼠的交配率和受孕率與對(duì)照組相比均未出現(xiàn)顯著變化。
4.胎鼠檢測(cè)結(jié)果:各
7、批次染鎘組胎鼠的體長(zhǎng)、尾長(zhǎng)、體重與正常對(duì)照組相比未出現(xiàn)顯著變化。120d批次的3.36mg Cd/kg組個(gè)別胎鼠出現(xiàn)趾骨骨化不全,頸椎椎體骨化不全或未骨化。所有胎鼠均未發(fā)現(xiàn)內(nèi)臟畸形。
5.仔鼠檢測(cè)結(jié)果:120d批次的3.36mg Cd/kg組的仔鼠體重與對(duì)照組相比明顯降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其他批次染鎘組仔鼠體重與正常對(duì)照組相比未出現(xiàn)明顯變化,各批次中所有組別的雌性仔鼠占仔鼠總數(shù)的比例均無(wú)明顯差異(P>0.
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