Notch配體在哮喘發(fā)病機制中作用的研究.pdf

1、背景：哮喘是由多種炎癥細胞參與的氣道慢性炎癥性疾病，也是一種多基因遺傳的復(fù)雜性狀疾病，其特點為氣道可逆性阻塞和氣道高反應(yīng)性。在哮喘的發(fā)病過程中以T淋巴細胞介導(dǎo)的對致敏原的免疫反應(yīng)是哮喘發(fā)病的關(guān)鍵性始動環(huán)節(jié)。研究證實，哮喘患者體內(nèi)存在Th1/Th2亞群的功能失衡：Th1型細胞免疫應(yīng)答反應(yīng)較正常人低，而Th2型的免疫應(yīng)答水平則顯著上調(diào)。 目的：明確Notch配體（Delta1、Jagged1、Jagged2）在小鼠哮喘模型肺中的表達

2、水平，探討其在哮喘發(fā)病機制中的作用。使用反義寡核苷酸干預(yù)Jagged1基因的表達，了解Jagged1反義寡核苷酸對哮喘小鼠肺細胞Jagged1表達及細胞因子（IL-4、IFN-γ）分泌的作用。 方法：通過卵清蛋白腹腔注射及霧化吸入建立BALB/c小鼠哮喘模型，采用半定量PCR檢測Notch配體（Delta1、Jagged1、Jagged2）的mRNA表達水平在哮喘組和正常對照組小鼠肺組織及肺細胞中是否存在差異。使用脂質(zhì)體將Jag

3、ged1反義寡核苷酸轉(zhuǎn)染入哮喘小鼠肺細胞，用半定量PCR檢測Jagged1反義寡核苷酸對哮喘小鼠肺細胞Jagged1 mRNA表達的作用，及采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法檢測肺細胞培養(yǎng)上清液中IL-4、IFN-γ的分泌。 結(jié)果：半定量RT-PCR分析顯示哮喘小鼠肺組織及肺細胞的Delta1 mRNA表達顯著低于正常對照組（P<0.001）；哮喘小鼠肺組織的Jagged1 mRNA表達顯著高于正常對照組（P<0.001），肺細胞

4、的Jagged1 mRNA表達高于正常對照組（P<0.05），兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義；哮喘小鼠肺組織及肺細胞的Jagged2 mRNA表達高于正常對照組（P<0.05），兩者差異有統(tǒng)計學(xué)意義。不同濃度的Jagged1反義寡核苷酸對哮喘小鼠肺細胞的Jagged1 mRNA表達具有不同的抑制作用，且反義寡核苷酸干預(yù)后肺細胞的IL-4分泌減少，IFN-γ分泌增加。 結(jié)論：Delta1配體可能主要調(diào)節(jié)哮喘Th1反應(yīng)，Jagged1、Jag