超嗜熱古菌Thermococcus siculi HJ21產(chǎn)高溫α-葡萄糖苷酶的研究.pdf

1、α-葡萄糖苷酶(α-glucosidase，EC3.2.1.20)又稱麥芽糖酶(maltase)和α-轉(zhuǎn)移葡萄糖苷酶(α-transglucosidase，EC2.4.1.24)，可以從低聚糖類底物的非還原性末端切開α-1，4糖苷鍵，釋放出葡萄糖，或?qū)⒂坞x出的葡萄糖殘基以α-1，6糖苷鍵轉(zhuǎn)移到另一個底物上，從而得到非發(fā)酵性的低聚異麥芽糖(IMO)、糖脂或糖肽等。α-葡萄糖苷酶在淀粉加工工業(yè)中可以用作糖化酶制劑，與α-淀粉酶一起生產(chǎn)高葡萄

2、糖漿。另外，α-葡萄糖苷酶作為工業(yè)化生產(chǎn)IMO的關(guān)鍵酶制劑備受國內(nèi)外食品工業(yè)界的重視。目前，工業(yè)生產(chǎn)中使用的α-葡萄糖苷酶主要來源于黑曲霉(Aspergillusniger)。 對一株分離自深海熱液口的超嗜熱古菌(ThermococcussiculiHJ21)菌株進行了產(chǎn)α-葡萄糖苷酶條件的優(yōu)化和酶學性質(zhì)的初步研究。胞內(nèi)發(fā)酵時間為6h，胞外發(fā)酵時間為21h時，較適合產(chǎn)α-葡萄糖苷酶；其最適產(chǎn)酶溫度為85℃，pH為6.5，NaCl

3、濃度為2.5％；可溶性淀粉、酵母粉和蛋白胨促進產(chǎn)酶。該α-葡萄糖苷酶的最適作用溫度為100℃，90℃半衰期為2h；最適酶作用pH值為7.0，在pH為5.0～8.0之間酶活力相對穩(wěn)定；該酶熱穩(wěn)定性不依賴Ca2+，且Ca2+對該酶有抑制作用，金屬離子Cu2+、Al3+、Ni2+對該酶有較明顯抑制作用，Hg2+強烈抑制該酶的活性，而EDTA、Fe3+和K+對該酶有激活作用。 以T.siculiHJ21染色體DNA為模板，采用PCR技術(shù)