豬肝CYP450 3A4和2D6活性及幾種獸藥對其影響的初步研究.pdf

1、CYP4503A4和2D6是肝細(xì)胞色素P450藥物代謝酶家族中兩鐘最重要的酶，分別參與了整個(gè)酶系代謝藥物中60％和30％的藥物代謝.通過對CYP3A4和2D6酶的研究可以進(jìn)一步明確藥物相互作用的機(jī)制，預(yù)防和減輕藥物間的相互作用，最大限度地提高藥物有效性和安全性，也可用于新藥的篩選與安全性評價(jià).同時(shí)通過測定CYP3A4和2D6酶活性可以指導(dǎo)臨床合理地聯(lián)合用藥，預(yù)測藥物潛在毒性和可能發(fā)生的不良反應(yīng)。目前有關(guān)豬的CYP450酶系的研究很少，而

2、關(guān)于常用獸藥對于豬cYP3A4和2D6的研究在國內(nèi)外均處于空白.本研究建立了探針?biāo)幬锓z測豬肝CYP3A4和2D6活性的方法，同時(shí)研究了多西環(huán)素、泰樂菌素和頭孢喹肟三種藥物對這兩種酶的活性影響。 1用探針?biāo)幬镞溥_(dá)唑侖研究豬肝CYP4503A4活性 以高壓液相色譜(HPLC)法為定量手段，通過研究CYP3A4探針?biāo)幬镞溥_(dá)唑侖在健康蘇鐘豬體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征，建立在豬肝CYP4503A4體內(nèi)活性的研究方法.50-60日齡蘇鐘豬6

3、頭，肌肉注射咪達(dá)唑侖后，前腔靜脈采血后，處理好血漿進(jìn)樣，用高壓液相色譜法檢測，經(jīng)3p97分析.結(jié)果：日內(nèi)，日間誤差分別小于3.74％和4.32％，方法的回收率高于90.604±2.53％，在0.05-25μg/ml血漿濃度范圍內(nèi)呈線性關(guān)系(R2=0.9993)，最低檢測濃度為O.051μg/ml.血漿藥物濃度.時(shí)間數(shù)據(jù)符合一級吸收二室開放模型，咪達(dá)唑侖主要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù)分別為：t1/2α為0.234±0.07 h，t1/2p為0.30±0.

4、04h，CL(s)為2.10±0.55 L/h，AUC為0.974±0.17μg·h/mL.這些參數(shù)同文獻(xiàn)報(bào)道的結(jié)果一致，說明在健康豬體內(nèi)的CYP3A4酶活性較好。 2用探針?biāo)幬餁滗逅嵊颐郎撤已芯緾YP4502D6活性 以高壓液相色譜(}tPLC)法為定量手段研究了CYP2D6探針?biāo)幬餁滗逅嵊颐郎撤以诮】堤K鐘豬體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征，建立豬肝CYP4502D6活性的體內(nèi)研究方法.50-60日齡豬6頭.灌服氫溴酸右美沙芬后，前腔

5、靜脈采血后，處理好血漿進(jìn)樣，用高壓液相色譜法檢測，經(jīng)3p97分析后發(fā)現(xiàn)：血漿藥物濃度.時(shí)間數(shù)據(jù)符合一級吸收一室開放模型，灌服氫溴酸右美沙芬主要?jiǎng)恿W(xué)參數(shù)分別為：t1/2α為0.86±0.24 h，t1/2β為2.584±0.22 h，CL(s)為0.22±0.03 L/h，AUC為4.52.4±0.41μg·h/mL.排除鐘屬差異，結(jié)果和文獻(xiàn)報(bào)道的基本一致，反應(yīng)了健康豬體內(nèi)的CYP4502D6活性較好。 3多西環(huán)素、泰樂菌素和頭

6、孢喹肟對豬肝CYP4503A4和2D6活性的影響 采用體內(nèi)探針?biāo)幬?咪達(dá)唑侖、氫溴酸右美沙芬)代謝的方法，研究多西環(huán)素，泰樂菌素和頭孢喹肟對豬肝細(xì)胞CYP4503A4和2D6亞型有無誘導(dǎo)或者抑制作用，為獸醫(yī)臨床用藥提供參考.將24頭豬隨機(jī)等分為對照組(生理鹽水)，多西環(huán)素誘導(dǎo)組(5mg/kg·bw)，泰樂菌素誘導(dǎo)組(10mg/kg·bw)和頭孢喹肟誘導(dǎo)組(2mg/kg·bw)連續(xù)用藥7天后，用高效液相色譜法分別測定咪達(dá)唑侖和氫溴

7、酸右美沙芬在四組豬體內(nèi)代謝過程中不同時(shí)間點(diǎn)的血藥濃度，并計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù).結(jié)論：其中，在對CYP3A4亞型的研究中發(fā)現(xiàn)，同對照組相比，T1/2β(消除半袁期)多西環(huán)素和泰樂菌素誘導(dǎo)組均顯著升高(P<0.01)，頭孢喹肟組顯著下降(P<0.01)；多西環(huán)素組的CL(s)(總體清除率)顯著減小(P<0.01)，頭孢喹肟的CL(s)(總體清除率)顯著增大(P<0.01)；多西環(huán)素組的AUC(藥-時(shí)曲線下面積)顯著增大(P<0.01)，頭孢喹肟組

8、的AUc(藥-時(shí)曲線下面積)顯著減小(P<0.01)；間接證明了多西環(huán)素對豬肝CYP3A4有較強(qiáng)的抑制作用，而頭孢喹肟對其有較強(qiáng)的誘導(dǎo)作用.在對CYP2D6亞型的研究中發(fā)現(xiàn)，同對照組相比，T1/2β(消除半表期)三個(gè)實(shí)驗(yàn)組均顯著升高(P<0.01)；頭孢喹肟組的CL(s)(總體清除率)顯著減小(P<0.01)；頭孢喹肟組的Auc(藥-時(shí)曲線下面積)顯著增大；間接證明了頭孢喹肟對豬肝CYP4502D6有較強(qiáng)的抑制作用，而多西環(huán)素和泰樂菌素