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1、背景及目的 肺癌是嚴(yán)重威脅人類健康的疾病,其病死率居所有惡性腫瘤之首,發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)。而且肺癌患者的5年生存率僅15%,多數(shù)患者在病程中出現(xiàn)腦、骨、腎上腺等遠(yuǎn)隔器官轉(zhuǎn)移,嚴(yán)重影響著患者的預(yù)后。本研究的目的在于探索一種運(yùn)用免疫磁珠富集并結(jié)合熒光細(xì)胞化學(xué)染色的方法來(lái)檢測(cè)循環(huán)上皮細(xì)胞(circulating epithelial cell)的可行性;了解循環(huán)上皮細(xì)胞與肺癌患者性別、年齡、臨床分期、腫瘤病理分型等臨床特征的聯(lián)系;探
2、索循環(huán)上皮細(xì)胞與遠(yuǎn)處器官轉(zhuǎn)移的相關(guān)性;探討化療前后外周血循環(huán)上皮細(xì)胞的變化;初步評(píng)價(jià)循環(huán)上皮細(xì)胞與放射影像學(xué)變化及臨床療效評(píng)價(jià)的相關(guān)性。 方法 自2006年4月至07年4月在北京協(xié)和醫(yī)院體檢的健康志愿者和在該院呼吸科接受住院治療的患者作為研究對(duì)象。設(shè)立正常對(duì)照組、良性肺疾病組及肺癌組三個(gè)試驗(yàn)組,采集正常組靜脈血標(biāo)本及未接受治療患者治療前外周靜脈血標(biāo)本。采用免疫磁珠富集分離及免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色方法檢測(cè)外周血細(xì)胞角蛋白(C
3、K)18/19表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞。再以初治肺癌患者為研究對(duì)象,入選者均接受常規(guī)化療,兩個(gè)周期后初步評(píng)價(jià)臨床療效,并在化療前及化療后采集靜脈血標(biāo)本作循環(huán)上皮細(xì)胞檢測(cè)。 結(jié)果 正常組納入16例,其中1例循環(huán)上皮細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,陽(yáng)性率為6.2%;非肺癌患者組納入12例,僅1例檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性,陽(yáng)性比為8.1%。肺癌組納入36例患者,治療前外周血中循環(huán)上皮細(xì)胞檢測(cè)的陽(yáng)性比為64%(23/36)。其中有17例肺癌患者進(jìn)行了治療前后監(jiān)測(cè)
4、,治療前CTC陽(yáng)性比為76%(13/17),治療后陽(yáng)性比為47%(8/17)。治療前CTC檢測(cè)的陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)為7.71±3.12,高于治療后的細(xì)胞數(shù)1.41±0.70,治療前后的細(xì)胞數(shù)存在顯著差異(P=0.017)。36例肺癌患者中Ⅲ期患者的CTC檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性比為41%,Ⅳ期患者檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果比率為84%。不同病理類型(包括腺癌、鱗癌、小細(xì)胞癌)腫瘤患者的CTC檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率分別為74%、25%、62%。 結(jié)論 免疫磁珠陰性
5、富集分離法結(jié)合熒光細(xì)胞化學(xué)染色方法檢測(cè)循環(huán)上皮細(xì)胞過(guò)程較為簡(jiǎn)便,檢測(cè)的特異性93%,敏感性64%。檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性的提高有待于發(fā)現(xiàn)更加特異和敏感的肺癌相關(guān)抗原及抗體。應(yīng)用這種檢測(cè)方法研究顯示,循環(huán)上皮細(xì)胞的陽(yáng)性率在肺癌患者和非肺癌患者間存在顯著差異。其陽(yáng)性率與有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān),但與性別、年齡及腫瘤的病理類型無(wú)關(guān)。循環(huán)上皮細(xì)胞在化療前后的變化與臨床治療相關(guān),治療前循環(huán)細(xì)胞數(shù)高于治療后細(xì)胞數(shù),其高低變化與臨床療效有一定相關(guān)性,但研究樣本
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