先天性感音神經(jīng)性聾的相關免疫因素研究.pdf

1、研究背景:我國新生兒的先天性聾發(fā)生率為1/1000-6/1000,其中以先天性感音神經(jīng)性聾(congenital sensorineural hearing loss,CSNHL)居多.非遺傳性CSNHL的病因主要有妊娠期病原微生物感染、使用耳毒性藥物、高危妊娠等.但仍有許多CSNHL原因不明.自身免疫性感音神經(jīng)性聾(autoimmune sensorineural hearing loss,ASNHL)的概念由McCabe于1979年

2、首次提出.研究發(fā)現(xiàn),內(nèi)耳具有發(fā)生免疫應答的解剖結(jié)構(gòu)和細胞成份,有針對特異性抗原發(fā)生局部免疫反應的能力.局部的免疫炎性反應可導致明顯的聽覺或前庭功能障礙以及內(nèi)耳免疫病理損傷,血清中可檢測到抗內(nèi)耳成分的自身抗體,主要為IgG類抗體.在其他妊娠合并自身免疫病的研究中發(fā)現(xiàn),母體內(nèi)的IgG類自身抗體可以通過胎盤轉(zhuǎn)運到胎兒體內(nèi),對胎兒或新生兒相應系統(tǒng)或器官的生長和發(fā)育產(chǎn)生影響.目前,尚無有關ASNHL母體的子代發(fā)生先天性感音神經(jīng)性聾的研究報道.研究

3、目的:旨在了解母體針對內(nèi)耳的自身免疫因素是否可以引起子代內(nèi)耳的功能和結(jié)構(gòu)的改變,導致CSNHL的發(fā)生.為CSNHL的病因?qū)W研究探索新的道路.實驗方法:1.用粗制內(nèi)耳抗原免疫雌性健康豚鼠建立ASNHL動物模型,并在孕期強化免疫至子鼠出生,同時設立對照組.2.子鼠出生后,分別記錄母代、子代豚鼠的聽神經(jīng)復合動作電位(compound action potential,cAP)的N<,1>波閾值、峰潛伏期、幅值以及0.5kHz、2kHz、8kH

4、z耳蝸微音器電位(cochlear microphonic potential,CM)偽閾,了解其聽覺功能狀況.3.采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測母代、子代豚鼠體內(nèi)抗內(nèi)耳組織抗原的特異性抗體含量.4.內(nèi)耳火棉膠切片,光鏡下觀察母代、子代豚鼠內(nèi)耳組織結(jié)構(gòu)和細胞的病理形態(tài)學改變.5.采用冰凍切片和全基底膜及螺旋韌帶鋪片術,觀察母代、子代豚鼠內(nèi)耳毛細胞、血管紋等組織細胞內(nèi)的琥珀酸脫氫酶(SDH)的活性變化,了解其有氧代謝狀況.實驗結(jié)果

5、:1.母代豚鼠中有22.5％發(fā)生了ASNHL,表現(xiàn)為cAP、CM一項以上指標的異常.2.ASNHL的雌鼠內(nèi)耳出現(xiàn)廣泛的病理損傷,表現(xiàn)為Rosenthal's管內(nèi)炎性細胞侵潤,螺旋神經(jīng)節(jié)細胞變性,頂周耳蝸骨壁及血管紋有含鐵血黃素顆粒,蝸軸神經(jīng)細胞減少,少數(shù)實驗耳山現(xiàn)嚴重的膜迷路積水,毛細胞萎縮,血管紋營養(yǎng)不良,蝸階、鼓階內(nèi)大量沉積物.3.ASNHL的母鼠血清抗內(nèi)耳組織抗原特異性抗體明顯升高.4.ASNHL的母鼠毛細胞及血管紋內(nèi)SDH活性降