中藥蘆薈大黃素光動力治療對人乳腺癌細胞MCF-7增殖、凋亡、侵襲、遷移的體外觀測.pdf

1、目的：
　　通過研究蘆薈大黃素(aloe emodin，AE)復合光動力對人乳腺癌MCF-7細胞增殖、凋亡、侵襲、遷移的影響，探討AE-PDT的作用機制。
　　方法：
　　AE-PDT對人乳腺癌MCF-7細胞的毒性作用用WST-8檢測；Edu染色和克隆實驗檢測細胞的增殖狀態(tài);細胞的凋亡被Anne-V/PI雙染流式和Hoechst染色檢測;JC-1染色通過綠色熒光/紅色熒光的比值反應線粒體膜電位及凋亡情況;Transwe

2、ll實驗觀察細胞遷移、侵襲的情況；活性氧物質（ROS）的水平用DCFH-DA染色檢測; Phalloidin-TRITC染色觀察細胞骨架 F-actin的變化；Western blot檢測Caspase-3、Caspase-9、Bcl-2Nrf2、VEGF、MMP2、MMP9、BIP、Chop蛋白表達的變化。
　　結果：
　　WST-8試劑盒檢測發(fā)現(xiàn)：AE-PDT(AE：10μmol/L，光功率：40mW/cm2，時間：30

3、0s)對人乳腺癌MCF-7細胞有明顯的毒性作用，其毒性作用呈一定的劑量效應關系(P＜0.05);Edu和克隆實驗發(fā)現(xiàn)AE-PDT組細胞的增殖抑制作用較空白對照組、單純AE組、單純光照組明顯(P＜0.05)；Anne-V/PI雙染流式發(fā)現(xiàn)AE-PDT對人乳腺癌MCF7細胞發(fā)生死亡的幾率明顯升高(P＜0.05);細胞核固縮、碎裂和凋亡小體可在AE-PDT組被Hoechst染色觀察;JC-1熒光染色發(fā)現(xiàn)AE-PDT組細胞膜電位明顯下降(P＜0

4、.05)；Transwell實驗發(fā)現(xiàn)AE-PDT對MCF-7細胞遷移、侵襲能力有顯著的抑制作用(P＜0.05)；AE-PDT組ROS水平升高被DCFH-DA熒光染色發(fā)現(xiàn);Phalloidin-TRITC染色觀察到AE-PDT可以顯著的抑制細胞骨架的重組(P＜0.05)；Western blot檢測發(fā)現(xiàn)Caspase-9、BIP、Chop、VEGF、Nrf2、MMP2 MMP9蛋白表達呈現(xiàn)早期升高晚期恢復原來水平的趨勢(P＜0.05)，