普羅布考抗ox-LDL誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞凋亡的作用及機(jī)制.pdf

1、目的：觀察普羅布考在ox-LDL誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞凋亡過程中對Daxx、CD36、Caveolin-1、ABCA1、Caspase3表達(dá)的影響，初步探討普羅布考抗ox-LDL誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞凋亡的機(jī)制。　　方法：流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率；吖啶橙(AO)熒光染色觀察細(xì)胞核形態(tài)。RT-PCR、間接免疫熒光法分別檢測Daxx、Caveolin-1、CD36、ABCA1、Caspase3mRNA和蛋白質(zhì)的表達(dá)。Westernblot

2、檢測Daxx蛋白質(zhì)的表達(dá)。檢測細(xì)胞內(nèi)丙二醛硫代巴比妥酸反應(yīng)物(TBARS)含量反映過氧化脂質(zhì)的水平。　　結(jié)果：100μg/mLox-LDL誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞凋亡率時序增加；ox-LDL孵育細(xì)胞48小時后，細(xì)胞出現(xiàn)核濃縮、碎裂、凋亡小體等凋亡特征；Daxx、Caveolin-1、CD36、ABCA1的表達(dá)增高。用50μmol/L普羅布考預(yù)處理細(xì)胞4小時，再用100μg/mLox-LDL孵育48小時后，細(xì)胞凋亡率由8.56±0.23％

3、下降至3.86±1.14％；Daxx、Caspase3mRNA和蛋白質(zhì)水平下調(diào)，Caveolin-1、ABCA1mRNA水平無明顯改變，蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)，而CD36的表達(dá)沒有改變。細(xì)胞內(nèi)TBARS含量由9.37±0.21下降至4.16±0.13nmol/mgprotein。　　結(jié)論：1.普羅布考通過下調(diào)Daxx、Caspase3蛋白質(zhì)的表達(dá)，抑制ox-LDL誘導(dǎo)THP-1巨噬細(xì)胞凋亡。2.普羅布考抗凋亡作用與普羅布考降低細(xì)胞內(nèi)氧化脂質(zhì)含