自然陳化過程中烤煙葉面微生物變化及應(yīng)用研究.pdf

1、跟蹤研究了云南保山B3F、云南保山Y(jié)B001(C2L、C2F混打)、津巴布韋LJM/S、巴西BCA/S以及山東莒縣、貴州務(wù)川、湖南新田C3F、B2F10個(gè)煙葉樣品自然陳化11～41個(gè)月期間葉面微生物種類和數(shù)量的變化，從中選出了生長(zhǎng)迅速、產(chǎn)β-淀粉酶、糖化酶、纖維素酶、果膠酶和蛋白酶較高的菌株7株，進(jìn)行了這7個(gè)菌株所產(chǎn)五種水解酶的誘導(dǎo)產(chǎn)生、溫度穩(wěn)定性研究，同時(shí)利用這7個(gè)菌株及其所產(chǎn)五種水解酶進(jìn)行了人工醇化試驗(yàn)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：1、細(xì)菌是葉面微生

2、物優(yōu)勢(shì)種群，其次為霉菌，酵母菌最少。在細(xì)菌中，芽孢細(xì)菌是葉面微生物優(yōu)勢(shì)種群，其次為非芽孢細(xì)菌；霉菌中以曲霉菌屬、青霉菌屬和毛霉菌屬為主。在芽孢細(xì)菌中以芽孢桿菌屬(Bacillus)細(xì)菌為主，占芽孢細(xì)菌總數(shù)90％左右，其次多為梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)細(xì)菌。2、在自然陳化11～41個(gè)月期間，共分離到芽孢細(xì)菌1049株，非芽孢細(xì)菌290株，霉菌175株，假絲酵母13株。對(duì)分離到細(xì)菌和霉菌優(yōu)勢(shì)菌群進(jìn)行了屬一級(jí)分類鑒定，細(xì)菌為芽孢

3、桿菌屬(Bacillus)、梭狀芽孢桿菌屬(Clostridium)：霉菌為曲霉菌屬(Aspergillus)、青霉菌屬(Penicillium)、毛霉菌屬(Mucor)、根霉菌屬(Rhizopus)、交鏈孢霉屬(Allernaria)、蠕孢菌屬(Helminthosporium)、梨頭霉菌屬(Absidia)、白僵霉菌屬(Bcauveria)、地霉菌屬(Geotrichum)、匍柄霉菌屬(Stemphylium)：3、不同產(chǎn)地微生物種

4、類數(shù)不同，巴西煙葉樣品微生物種類最多，其次為津巴布韋煙葉，湖南B2F樣品微生物種類最少。4、葉面微生物種類和數(shù)量隨著季節(jié)變化而變化，5～10月份微生物種類和數(shù)量最多，12月份到第二年3月份種類和數(shù)量最少。5、陳化時(shí)間對(duì)微生物種類和數(shù)量有影響，陳化11～26個(gè)月期間微生物種類和數(shù)量較大，以后隨著陳化時(shí)間增加，微生物種類和數(shù)量顯著降低。煙葉陳化28個(gè)月后，檢測(cè)不到霉菌的存在。6、研究了烤煙葉面微生物菌株五種水解酶(β-淀粉酶、糖化酶、纖維素

5、酶、果膠酶和蛋白酶)的誘導(dǎo)產(chǎn)生及其溫度穩(wěn)定性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)2％煙葉水溶液為基本培養(yǎng)基，分別添加0.2％五種水解酶相應(yīng)的誘導(dǎo)物，對(duì)所研究的烤煙葉面微生物菌株五種水解酶的產(chǎn)生均具有誘導(dǎo)作用。五種水解酶在60℃時(shí)均不穩(wěn)定，易失活；50℃時(shí)，除果膠酶外，其他四種水解酶的溫度穩(wěn)定性較好。在對(duì)五種水解酶60℃保溫2h過程中的所取樣品測(cè)定酶活時(shí)發(fā)現(xiàn)，60℃反應(yīng)所得的酶活都高于各自酶活測(cè)定常規(guī)方法中所用溫度反應(yīng)所得的酶活。7、微生物及其酶系對(duì)于縮短煙葉醇化