水楊酸鈉壓抑中樞聽(tīng)覺(jué)系統(tǒng)GABA能抑制性突觸傳遞.pdf

1、阿斯匹林是臨床上廣泛運(yùn)用的解熱鎮(zhèn)痛藥物，由于其具有抗凝血作用，近年來(lái)小劑量服用阿斯匹林被用來(lái)預(yù)防和治療心腦血管疾病。水楊酸是阿斯匹林的主要代謝產(chǎn)物，也是起藥理作用的有效成分。由于大劑量的水楊酸鈉可以在動(dòng)物上可靠地誘導(dǎo)出耳鳴樣行為，因此水楊酸鈉經(jīng)常被用于研究耳鳴產(chǎn)生的神經(jīng)機(jī)制。最新的臨床結(jié)果以及正電子成像實(shí)驗(yàn)(PET)表明水楊酸鈉誘導(dǎo)的耳鳴往往起源于聽(tīng)覺(jué)中樞，即除了外周的作用靶點(diǎn)以外，水楊酸鈉誘導(dǎo)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)功能改變亦有可能引發(fā)耳鳴。以

2、往的在體電生理實(shí)驗(yàn)的確為我們了解水楊酸鈉產(chǎn)生耳鳴的中樞神經(jīng)機(jī)制提供了許多有益的資料，但是這些結(jié)果并不能說(shuō)明中樞的這些變化究竟是水楊酸鈉直接作用導(dǎo)致的，還是由于外周或低位中樞的改變所繼發(fā)的。中樞神經(jīng)系統(tǒng)興奮性和抑制性的失平衡被認(rèn)為是耳鳴產(chǎn)生的候選機(jī)制。因?yàn)樗畻钏徕c能夠通過(guò)血腦屏障，并且在具有耳鳴行為學(xué)表現(xiàn)的模型動(dòng)物腦脊液中達(dá)到較高的濃度，所以水楊酸鈉有可能通過(guò)直接作用于中樞聽(tīng)覺(jué)系統(tǒng)而改變興奮性和抑制性的平衡，從而導(dǎo)致耳鳴。 聽(tīng)覺(jué)中

3、樞GABA能抑制對(duì)聽(tīng)覺(jué)中樞神經(jīng)元的反應(yīng)特性有著重要的影響，而去抑制會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)元感受野變寬以及興奮性升高。中樞GABA能神經(jīng)元受到許多神經(jīng)調(diào)質(zhì)系統(tǒng)的重要調(diào)控，那么水楊酸鈉是否通過(guò)影響這些調(diào)質(zhì)系統(tǒng)從而影響到神經(jīng)元的興奮性水平?本博士論文運(yùn)用全細(xì)胞膜片鉗技術(shù)分別在離體的聽(tīng)皮層和下丘上檢驗(yàn)了水楊酸鈉對(duì)抑制性突觸傳遞以及對(duì)五羥色胺(5-HT，serotonin)能神經(jīng)調(diào)質(zhì)系統(tǒng)的影響。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下： 1.在急性分離的聽(tīng)覺(jué)皮層腦片上，通過(guò)

4、刺激周邊的抑制性神經(jīng)元纖維，能夠從Ⅱ/Ⅲ層錐體細(xì)胞上記錄到誘發(fā)的抑制性突觸后電流(eIPSCs)，灌流1.4 mM的水楊酸鈉后，神經(jīng)元的輸入阻抗沒(méi)有改變，但是eIPSCs的幅值表現(xiàn)出明顯的壓抑，而且這種壓抑具有濃度依賴(lài)性和可逆性。用1 μM TTX阻斷神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)中自發(fā)的動(dòng)作電位，以便記錄到微小的抑制性突觸后電流(mIPSCs)，結(jié)果表明水楊酸鈉顯著地降低了mIPSCs的頻率和幅度。這說(shuō)明突觸前和突觸后的因素共同參與了水楊酸鈉對(duì)IPSCs的

5、壓抑。該結(jié)果提示由于玉抑制所導(dǎo)致的聽(tīng)皮層興奮性升高可能是水楊酸鈉誘發(fā)耳鳴的神經(jīng)機(jī)制之一。 2.因?yàn)?-HT能神經(jīng)調(diào)質(zhì)系統(tǒng)優(yōu)先性支配中樞神經(jīng)系統(tǒng)的GABA能神經(jīng)元，所以水楊酸鈉可能影響了5-HT對(duì)GABA能突觸傳遞的調(diào)控，從而導(dǎo)致了興奮性和抑制性的失平衡。在離體下丘腦片上，阻斷谷氨酸能和甘氨酸能的突觸傳遞后，可以得到藥理學(xué)分離的GABA能自發(fā)的抑制性突觸后電流(sIPSCs)。在灌流40μM 5-HT后，GABA能sIPSCs的頻

6、率和幅度得到了極為顯著的增強(qiáng)。這種5-HT誘發(fā)的sIPSCs的動(dòng)力學(xué)特性以及反轉(zhuǎn)電位均無(wú)明顯改變，說(shuō)明5-HT誘發(fā)的sIPSCs仍然是GABA能的。1.4 mM的水楊酸鈉能夠顯著壓抑5-HT所誘發(fā)的sIPSCs增加，而0.5μMTTX可以模擬水楊酸鈉的作用，這表明水楊酸鈉通過(guò)壓抑GABA能神經(jīng)元自發(fā)的動(dòng)作電位來(lái)壓抑5-HT誘發(fā)的sIPSCs的增加。該結(jié)果表明水楊酸鈉可能通過(guò)優(yōu)先性地作用于GABA能神經(jīng)元，從而在水楊酸鈉誘導(dǎo)耳鳴的情況下破