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文檔簡(jiǎn)介
1、羊絨是珍貴的天然纖維資源,因穿著的舒適性、保暖性及良好的色澤度倍受消費(fèi)者喜愛(ài)。然而羊絨產(chǎn)量有限,羊絨制品業(yè)成了當(dāng)然的高檔奢飾品,因而提高產(chǎn)絨性能,挖掘絨山羊產(chǎn)絨的遺傳潛力是絨山羊生產(chǎn)中的研究熱點(diǎn)。絨山羊羊絨的生長(zhǎng)受品種及相關(guān)激素的調(diào)控,本文通過(guò)研究燕山絨山羊和承德黑山羊不同生絨期(旺盛期和退行期)相關(guān)激素的分泌與基因表達(dá),探討生絨期和品種與產(chǎn)絨性能的關(guān)系,以期為提高絨山羊產(chǎn)絨性能奠定理論基礎(chǔ)。
本研究以生絨旺盛期及退行期的燕山
2、絨山羊和承德黑山羊?yàn)樵囼?yàn)對(duì)象采集血清,利用放射性免疫法對(duì)其血清中的褪黑素(melatonin,MT)、催乳素(prolactin,PRL)、生長(zhǎng)激素(growth hormone,GH)和甲狀腺素(thyroid hormone,T3)進(jìn)行測(cè)定分析。不同絨毛生長(zhǎng)時(shí)期不同品種間濃度不同,燕山絨山羊和承德絨山羊褪黑素的濃度生絨旺盛期均顯著高于退行期(P<0.01),而催乳素的濃度則在絨毛生長(zhǎng)的旺盛期均極顯著低于退行期(P<0.01),生絨旺
3、盛期燕山絨山羊褪黑素和催乳素的濃度均顯著低于承德黑山羊(P<0.05),生長(zhǎng)激素的濃度在燕山絨山羊不同時(shí)期表達(dá)不顯著(P>0.05),而承德黑山羊差異極顯著(P<0.01),品種間的生長(zhǎng)激素的濃度則只在生絨旺盛期差異顯著(P<0.05),燕山絨山羊和承德黑山羊的甲狀腺素在不同品種及不同絨毛生長(zhǎng)時(shí)期各組間差異均不顯著(P>0.05)。
本研究還采集了皮膚組織,利用實(shí)時(shí)熒光定量PCR法(RT-qPCR)分析了激素受體基因mRNA表
4、達(dá)水平的差異。利用絕對(duì)定量標(biāo)準(zhǔn)曲線拷貝數(shù)對(duì)不同時(shí)期不同品種的絨山羊的Retinoic acid receptor related orphan receptor(RORa)、Short prolactinreceptor(S-PRLR)、Epidermal growth factor receptor(EGFR)、Insulin like growth factor1(IGF-Ⅰ)mRNA表達(dá)量進(jìn)行分析比較。這些受體基因mRNA在品種間
5、及不同絨毛生長(zhǎng)時(shí)期的表達(dá)均不相同,燕山絨山羊和承德黑山羊RORa mRNA的表達(dá)量旺盛期均顯著低于退行期(P<0.05),品種間比較只在退行期差異顯著(P>0.05);燕山絨山羊S-PRLR mRNA表達(dá)量旺盛期顯著高于退行期(P<0.05),承德黑山羊則差異不顯著(P>0.05),品種間在兩時(shí)期差異顯著(P<0.05);燕山絨山羊和承德黑山羊EGFR mRNA表達(dá)量旺盛期顯著高于退行期(P<0.01),品種間在絨毛生長(zhǎng)的兩個(gè)時(shí)期差異不
6、顯著(P>0.05);燕山絨山羊IGF-Ⅰ mRNA表達(dá)量旺盛期顯著高于退行期(P<0.01),承德黑山羊差異不顯著(P>0.05),品種間則只在生絨旺盛期時(shí)差異顯著(P<0.01)。
為了進(jìn)一步在蛋白水平對(duì)受體基因(RORa、S-PRLR、EGFR、IGF-Ⅰ)進(jìn)行分析,本研究利用蛋白免疫印跡法對(duì)兩品種絨山羊在旺盛期及退行期皮膚組織的蛋白進(jìn)行驗(yàn)證,這些蛋白在絨山羊皮膚中均有表達(dá),燕山絨山羊和承德黑山羊生絨旺盛期及退行期ROR
7、a和PRLR蛋白表達(dá)量顯著低于退行期(P<0.05),在絨毛生長(zhǎng)的兩個(gè)不同時(shí)期燕山絨山羊RORa和PRLR蛋白表達(dá)量顯著高于承德黑山羊(P<0.05)。燕山絨山羊、承德黑山羊EGFR生絨旺盛期的蛋白表達(dá)量分別顯著高于退行期(P<0.05);在兩個(gè)不同生絨時(shí)期EGFR蛋白表達(dá)量燕山絨山羊與承德黑山羊差異不顯著(P>0.05)。燕山絨山羊IGF-Ⅰ蛋白表達(dá)量在生絨旺盛期顯著高于退行期(P<0.05),而承德黑山羊差異不顯著(P>0.05);
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