工頻磁場(chǎng)對(duì)人早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞分泌功能及凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響.pdf

1、工頻磁場(chǎng)是由50或60 Hz交變電流所產(chǎn)生的磁場(chǎng),屬于極低頻磁場(chǎng).它通常存在于工農(nóng)業(yè)電器設(shè)備、家用電器及輸變電設(shè)施周?chē)?近年來(lái),電力事業(yè)的迅猛發(fā)展及電器設(shè)施的廣泛應(yīng)用,使得人們?nèi)粘Ｉ罴肮ぷ鳝h(huán)境中極低頻電磁場(chǎng)的強(qiáng)度不斷增高,成為新的污染源. 近三十年來(lái),陸續(xù)有流行病學(xué)調(diào)查報(bào)道孕期暴露于工頻磁場(chǎng)可引起流產(chǎn)、宮內(nèi)生長(zhǎng)發(fā)育遲緩、先天畸形、低出生體重、死胎、性別比改變等不良妊娠結(jié)局,并在部分動(dòng)物實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí),引起了公眾的迫切

2、關(guān)心和學(xué)者的廣泛關(guān)注.但同時(shí),也有部分流行病學(xué)調(diào)查、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、體外實(shí)驗(yàn)報(bào)道工頻磁場(chǎng)對(duì)妊娠結(jié)局并無(wú)有害效應(yīng).陰陽(yáng)性兩方面的結(jié)果使得目前無(wú)法對(duì)工頻磁場(chǎng)的健康影響作出科學(xué)評(píng)價(jià). 妊娠結(jié)局直接關(guān)系到未來(lái)人口質(zhì)量,因此迫切需要加強(qiáng)此方面的研究.而現(xiàn)有的流行病學(xué)調(diào)查和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在著矛盾,無(wú)法得到一致的結(jié)論.如果能在作用機(jī)制上有所發(fā)現(xiàn),那么便可以為流行病學(xué)調(diào)查、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究結(jié)論提供解釋和支持,同時(shí),也可為環(huán)境電磁場(chǎng)標(biāo)準(zhǔn)制定提供一定依據(jù).因

3、此,探明工頻磁場(chǎng)的作用機(jī)制應(yīng)當(dāng)是解決問(wèn)題的關(guān)鍵. 正常妊娠的維持有賴(lài)于母體胎盤(pán),尤其是滋養(yǎng)細(xì)胞的正常功能.一方面,胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞是人絨毛促性腺激素(HCG)和孕酮的主要來(lái)源;另一方面,滋養(yǎng)細(xì)胞是構(gòu)成胎兒與母體間胎盤(pán)屏障的主要成分之一.目前已經(jīng)證明,HCG和孕酮對(duì)維持早期妊娠起到非常關(guān)鍵的作用,分泌減少極有可能導(dǎo)致流產(chǎn).外界不良因素,如藥物等,可通過(guò)誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)度凋亡,直接影響胎盤(pán)屏障的完整性以及減少HCG和孕酮激素的分泌,從而

4、導(dǎo)致不良效應(yīng)的產(chǎn)生,這是外界因素致不良妊娠結(jié)局的主要機(jī)制.本學(xué)位論文計(jì)劃從這兩方面探討工頻磁場(chǎng)的作用機(jī)制. 為此,本研究在嚴(yán)格控制實(shí)驗(yàn)條件下,采用人孕早期絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞為研究對(duì)象,研究工頻磁場(chǎng)對(duì)外界因素導(dǎo)致不良妊娠結(jié)局的重要靶位-胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞分泌功能和凋亡的影響,以直觀地反映工頻磁場(chǎng)的生殖健康效應(yīng)及其可能的作用機(jī)制.第一部分:工頻磁場(chǎng)對(duì)人早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞分泌功能的影響每個(gè)絨毛分離所得的滋養(yǎng)細(xì)胞接種于10個(gè)四孔培養(yǎng)板小孔中,隨機(jī)分為

5、兩組,第一組為輻照組,5孔細(xì)胞放入輻照系統(tǒng),以50 Hz、0.4 mT及0.2 mT的工頻磁場(chǎng)分別輻照6、12、24、48、72 h;第二組為對(duì)照組,5孔細(xì)胞放入培養(yǎng)箱,除不接受輻照外其他條件與輻照組相同.在各時(shí)間點(diǎn)將輻照組細(xì)胞與其相應(yīng)的對(duì)照組細(xì)胞同時(shí)取出,吸取上清液,測(cè)定HCG和孕酮含量.結(jié)果顯示0.4 mT.磁場(chǎng)輻照后,72 h亞組HCG及孕酮分泌量的變化倍數(shù)分別為(0.77±0.18)和(0.54±0.21),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P

6、<0.05,P<0.01);0.2 mT磁場(chǎng)輻照后各時(shí)間亞組HCG、孕酮分泌量變化倍數(shù)平均值均接近1,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05).結(jié)果表明,較高強(qiáng)度、長(zhǎng)時(shí)間工頻磁場(chǎng)輻照對(duì)體外培養(yǎng)的人早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞分泌功能有抑制作用.第二部分:工頻磁場(chǎng)對(duì)人早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡相關(guān)基因表達(dá)的影響每個(gè)絨毛分離所得的滋養(yǎng)細(xì)胞接種于6個(gè)四孔培養(yǎng)板小孔中,隨機(jī)分為兩組,第一組為輻照組,3孔細(xì)胞放入輻照系統(tǒng),以50 Hz、0.4 mT的工頻磁場(chǎng)分別輻照6、

7、48、72 h;第二組為對(duì)照組,3孔細(xì)胞放入培養(yǎng)箱,除不接受輻照外其他條件與輻照組相同.在各時(shí)間點(diǎn)將輻照組細(xì)胞與其相應(yīng)的對(duì)照組細(xì)胞同時(shí)取出,提取總RNA,用熒光定量逆轉(zhuǎn)錄一聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)Bcl-2、Bax、Caspase-3、p53、Fas等凋亡相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄水平的改變.結(jié)果發(fā)現(xiàn)0.4 mT磁場(chǎng)輻照6、48、72 h后,各基因表達(dá)變化倍數(shù)平均值均接近1,差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),說(shuō)明0.4 mT工頻磁場(chǎng)輻照6、

8、48、72 h不影響B(tài)cl-2、Bax、Caspase-3、p53、Fas等基因的轉(zhuǎn)錄水平,推測(cè)工頻磁場(chǎng)抑制滋養(yǎng)細(xì)胞HCG和孕酮分泌可能不通過(guò)促進(jìn)凋亡這一途徑,其影響激素分泌的具體機(jī)制有待進(jìn)一步探索. 結(jié)論: 在本研究條件下,基于上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可得出以下結(jié)論: 1、較高強(qiáng)度、長(zhǎng)時(shí)間工頻磁場(chǎng)輻照對(duì)體外培養(yǎng)的人早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞分泌功能有抑制作用; 2、0,4.mT工頻磁場(chǎng)輻照體外培養(yǎng)的人早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞6、4