以桂枝茯苓丸方藥探討含揮發(fā)性成分復(fù)方用“半仿生提取法”研究的模式.pdf

1、目的：以桂枝茯苓丸方藥為研究對象，采用多指標(biāo)成分綜合評價的方法，進(jìn)一步探討含揮發(fā)性成分的中藥復(fù)方藥效物質(zhì)用“半仿生提取法（SBE法）”研究的基本思路與模式。 方法：首先對桂枝茯苓丸方藥進(jìn)行文獻(xiàn)綜述和飲片質(zhì)量鑒定研究。提取工藝研究時，先將方中含揮發(fā)性成分的中藥（桂枝、牡丹皮、赤芍、桃仁）用超臨界流體萃取，以均勻設(shè)計U7（74）表布點實驗，桂皮醛、肉桂酸、丹皮酚、總萃取物為指標(biāo)，綜合評判，優(yōu)選出方藥超臨界CO2萃取（SFE-CO2）

2、的較佳工藝條件；再將超臨界萃取后的藥渣與方中剩余的茯苓混合，用SBE法提取，以U9（91×33）表布點實驗，芍藥苷、肉桂酸、苦杏仁苷、茯苓酸、總多糖、干浸膏為指標(biāo)，綜合評判，優(yōu)選出SBE法較佳工藝條件。在優(yōu)選出該方藥SFE-CO2法和SBE法較佳提取工藝的基礎(chǔ)上，用比例分割法優(yōu)選SBE液和WE液（水提液）較佳醇沉濃度，以及該方藥醇（AE）提的較佳濃度；在此基礎(chǔ)上，對SBE法、WE法、SBAE法（半仿生提取醇沉法）、WAE法（水提醇沉法）

3、、AE法（醇提法）的5種提取液進(jìn)行了多指標(biāo)成分、HPLC指紋圖譜比較。 因為化學(xué)等值不一定生物等效。又對5種提取液作活血化瘀、抗實驗性痛經(jīng)、抗炎、增強(qiáng)免疫和改善大鼠乳腺增生作用的主要藥效學(xué)及急性毒性比較。同時對5種含藥血清進(jìn)行了HPLC指紋圖譜和對縮宮素所致大鼠離體子宮平滑肌活動影響作用的比較研究。最后綜合評判，優(yōu)選出桂枝茯苓丸方藥的較佳提取工藝條件。 在提取工藝研究的基礎(chǔ)上，進(jìn)行了桂枝茯苓丸的劑型改革研究，確定了桂枝茯

4、苓軟膠囊的制備工藝，制定了質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（草案）。 結(jié)果：（1）優(yōu)選出的桂枝茯苓丸方藥中含揮發(fā)性成分的中藥超臨界流體萃取的工藝條件為：萃取壓力30MPa、萃取溫度36℃、分離溫度32℃、萃取時間3．5h。（2）優(yōu)選出桂枝茯苓丸方藥的SBE法工藝條件為：3煎用水pH依次為5．0、7．5、8．0；提取時間依次為2．0h、1．5h、1．5h。（3）SBE液醇沉較佳濃度為60%。（4）WE液醇沉較佳濃度為70%。（5）醇提較佳濃度為70%。（

5、6）5種方法提取液（SBE、SBAE、WE、WAE、AE）指標(biāo)成分的綜合評判值順序為：YSBE>YAE>YWE> YSBAE> YWAE。（7）5種方法提取液指紋圖譜相對應(yīng)的特征峰總面積以SBE液最大。（8）5種方法提取液血清指紋圖譜以SBE液含藥血清色譜峰特征峰總面積最大，共有峰重疊率最高。（9）5種方法提取液主要藥效學(xué)綜合評價結(jié)果以SBE液最佳，最大耐受量試驗動物無一死亡。（10）5種方法提取液及含藥血清對大鼠離體子宮平滑肌活動試驗

6、表明，SBE液及其含藥血清綜合評價值最大。（11）確定了桂枝茯苓軟膠囊的最佳成型工藝，制訂了桂枝茯苓軟膠囊的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以方便有效地控制其內(nèi)在質(zhì)量。 結(jié)論：桂枝茯苓丸方藥提取，以先將含揮發(fā)性成分的中藥（桂枝、牡丹皮、赤芍、桃仁）用SFE-CO2萃取，其藥渣與方中剩余的茯苓混合，再用SBE法提取為佳。SBE法提取液及其含藥血清與其他提取方法（WE法、SBAE法、WAE法、AE法）作相應(yīng)比較，藥效物質(zhì)含量高，藥理作用強(qiáng)。本研究再一次驗