經(jīng)照射的單倍體相合供者淋巴細胞輸注抗小鼠黑色素瘤的效應研究.pdf

1、目的：供者淋巴細胞輸注（DLI）作為一種過繼細胞免疫治療（ACI）重要手段，常與造血干細胞移植聯(lián)合，已被用于治療血液系統(tǒng)惡性腫瘤和某些實體瘤，本研究在CB6F1小鼠→CC3HF1小鼠(F1→F1)輸注模型中，探討了單倍體相合供者淋巴細胞輸注的抗小鼠黑色素瘤效應及其相關機制。
　　方法：建立F1-F1單倍體相合輸注模型，以皮下接種B16-F10黑色素瘤細胞的CB6F1小鼠（表型為H-2b/d）為受者鼠，以CC3HF1小鼠（表型為H-

2、2d/k）為供者鼠。分為4組：PBS組：尾靜脈注射PBS；CTX組：環(huán)磷酰胺（cyclophosphamide, CTX）化療+尾靜脈注射PBS；CTX+T細胞組：CTX化療+輸注經(jīng)照射供者鼠脾細胞中的T細胞部分；CTX+脾細胞組：C TX化療+輸注經(jīng)照射供者鼠脾細胞。觀察各組小鼠的腫瘤體積、體重、生存時間、瘤重等；檢測受者鼠體內(nèi)的供者淋巴細胞存活情況、淋巴細胞亞群細胞的數(shù)量變化；LDH法檢測宿主對腫瘤細胞的殺傷能力；ELISA法檢測宿

3、主血清中IFN-γ、IL-2濃度變化，觀察各DLI組小鼠有無GVHD（移植物抗宿主病）臨床癥狀及重要臟器的病理學變化。
　　結(jié)果：在腫瘤體積、中位生存時間、瘤重上，P BS組與C TX組相比無統(tǒng)計學差異，CTX+T細胞組與 CTX+脾細胞組相比也無顯著差異（P>0.05）；各 DLI組的腫瘤體積小于PBS組（8.07±1.66cm3、8.24±1.45cm3 vs.10.84±1.11cm3， P<0.05），瘤重也小于PBS組（

4、8.19±0.82g、7.62±0.94 g v s.12.38±2.73g，P<0.05），小鼠中位生存時間長于PBS組（31±3.286d、36±2.191d v s.19±0.548d，P<0.05）。各DLI組均未出現(xiàn)明顯GVHD。各DLI組的供者淋巴細胞于輸注后5天內(nèi)消失，但在輸注后第10天，宿主脾細胞仍對腫瘤細胞有較強的殺傷作用。各DLI組可有效增加細胞因子（IL-2、IFN-γ）的分泌，增加CD8+T細胞和NK細胞的數(shù)量。