壓力對純化培養(yǎng)的大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡的相關(guān)實驗研究.pdf

1、【目的】視風(fēng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cells-RGCs)死亡是許多眼病特別是青光眼的根本病理,而壓力是導(dǎo)致RGCs凋亡的重要因素之一.我們用SD系大鼠腦源性星型膠質(zhì)細(xì)胞同化培養(yǎng)液雙界面法培養(yǎng)羊抗鼠Thy1.1單克隆抗體純化的SD系大鼠RGCs,在體外成功的使純化培養(yǎng)的大鼠RGCs成活2w以上.在此基礎(chǔ)上,研究不同壓力下純化培養(yǎng)的大鼠RGCs中誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide sy

2、nthase,iNOS)mRAN及其蛋白質(zhì)的表達(dá);凋亡相關(guān)基因bcl-2、bax及p53 mRNA表達(dá);Fas/FasL mRNA的表達(dá)以及L-精氨酸(L-arginine,L-Arg)和左旋-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)在純化培養(yǎng)的RGCs凋亡機制中的作用.探討青光眼RGCs的凋亡機制.【結(jié)論】通過實驗我們發(fā)現(xiàn):①腦源性星形膠質(zhì)細(xì)胞同化培養(yǎng)液雙界面法能使純化的RGCs存活較長時間,為進(jìn)一步實驗提供了體外純化培養(yǎng)RGCs模型.②壓力可

3、激活視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞誘導(dǎo)型一氧化氮合酶mRNA及其蛋白質(zhì)的表達(dá),由此產(chǎn)生超生理劑量的一氧化氮導(dǎo)致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞凋亡.③高于20mmHg的壓力,時間超過24h可激活體外培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的相關(guān)凋亡基因?qū)е录?xì)胞的凋亡.④壓力可激活視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞Fas/FasL mRNA表達(dá),Fas/FasL系統(tǒng)活化參與了青光眼高眼壓下視網(wǎng)膜神經(jīng)元細(xì)胞的凋亡.⑤L-精氨酸低濃度時能促進(jìn)RGCs的生長,高濃度時則促進(jìn)細(xì)胞凋亡;L-NAME對L-精氨酸的