預(yù)構(gòu)皮瓣的血管化研究和臨床應(yīng)用.pdf

1、預(yù)構(gòu)皮瓣是根據(jù)受區(qū)需要，通過(guò)血管載體植入的方式，在不含軸型血管的區(qū)域構(gòu)建出可帶血供轉(zhuǎn)移的組織瓣，是治療復(fù)雜的畸形和大面積缺損的手段之一。然而，由于血管化不足引起的預(yù)構(gòu)皮瓣壞死的問(wèn)題限制了該技術(shù)的臨床應(yīng)用。血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelialprogenitorcells，EPCs)移植是目前治療缺血性疾病，促進(jìn)血管新生的一種新方法。 本研究第一部分針對(duì)預(yù)構(gòu)皮瓣血管化不足，建立大鼠骨髓來(lái)源的EPCs的分離、誘導(dǎo)、鑒定的方法，然后

2、在大鼠腹部預(yù)構(gòu)皮瓣模型中探討EPCs移植的治療作用。第二部分采用皮瓣預(yù)構(gòu)技術(shù)，探討建立一種修復(fù)嚴(yán)重顏面燒傷后大面積瘢痕的治療方法，以提高這一臨床難題的治療效果。 1.血管內(nèi)皮祖細(xì)胞促進(jìn)預(yù)構(gòu)皮瓣血管化的實(shí)驗(yàn)研究 目的：探討骨髓來(lái)源的血管內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)移植促進(jìn)預(yù)構(gòu)皮瓣血管新生、提高皮瓣存活面積的可行性，比較EPCs與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在促進(jìn)預(yù)構(gòu)皮瓣血管新生作用上的差異。 方法：體外分離Wistar大

3、鼠骨髓單個(gè)核細(xì)胞，誘導(dǎo)分化為EPCs，并從形態(tài)、表型、功能上鑒定。建立大鼠腹部預(yù)構(gòu)皮瓣模型；45只大鼠隨機(jī)分為3組：局部應(yīng)用EPCs(組Ⅰ)、VEGF165(組Ⅱ)、PBS(組Ⅲ)；4周后形成以植入血管為蒂的島狀皮瓣，原位縫合；術(shù)后7天對(duì)皮瓣存活、血管新生情況進(jìn)行檢測(cè)。應(yīng)用CM-DiI標(biāo)記移植細(xì)胞，結(jié)合vWF免疫熒光染色，熒光顯微鏡下觀察標(biāo)記細(xì)胞在皮瓣中分布及轉(zhuǎn)歸。 結(jié)果：培養(yǎng)7天的貼壁細(xì)胞呈“鋪路石”外觀，表達(dá)CD34、Flk

4、-1及CD133，具有攝取DiI-acLDL，結(jié)合FITC-UEA-1的能力。組Ⅰ、組Ⅱ、組Ⅲ的皮瓣存活率分別為87.26±10.13％，66.13±9.9％，55.59±13.06％，(P＜0.001)；微血管密度分別為：38.67±9.52，25.83±6.33，26.5±5.61capillary/mm2(P＜0.05)；組Ⅰ與組Ⅱ、組Ⅲ比較，微血管顯影血管網(wǎng)更豐富，范圍更廣，分支更粗。可以觀察到熒光標(biāo)記的EPCs整合到缺血部位新

5、生血管中，表達(dá)vWF。 結(jié)論：骨髓來(lái)源的EPCs可以促進(jìn)預(yù)構(gòu)皮瓣的血管新生，提高存活率。在促進(jìn)預(yù)構(gòu)皮瓣血管新生上EPCs優(yōu)于VEGF。 2.預(yù)構(gòu)皮瓣在大面積顏面瘢痕修復(fù)中的應(yīng)用 目的：應(yīng)用皮瓣預(yù)構(gòu)技術(shù)，建立一種修復(fù)顏面部大面積皮膚軟組織缺損的有效方法。 方法：選擇嚴(yán)重顏面部燒傷的患者為治療對(duì)象。手術(shù)分兩期進(jìn)行。一期手術(shù)時(shí)，切取以旋股外側(cè)動(dòng)脈降支為蒂的肌膜瓣，與面動(dòng)脈或甲狀腺上動(dòng)脈吻合，植入頸胸部皮下，于筋

6、膜瓣下放置皮膚擴(kuò)張器。擴(kuò)張完畢后，形成以植入血管為蒂的預(yù)構(gòu)島狀皮瓣，用于面頸部皮膚缺損的修復(fù)。術(shù)后隨訪重建顏面的膚色、質(zhì)地、表情恢復(fù)情況。 結(jié)果：臨床治療9例患者。經(jīng)過(guò)平均23.78周擴(kuò)張后，擴(kuò)張器平均注液1489ml，預(yù)構(gòu)皮瓣的面積為12×15～15×28cm。所有的病例有效的覆蓋面頸部創(chuàng)面，供瓣區(qū)直接拉攏縫合。二期術(shù)后皮瓣出現(xiàn)不同程度的靜脈回流障礙，5例發(fā)生皮瓣遠(yuǎn)端部分壞死。術(shù)后隨訪，轉(zhuǎn)移皮瓣與修復(fù)部位周圍的皮膚色澤、質(zhì)地接