α粒子輻射誘發(fā)人支氣管上皮惡性轉(zhuǎn)化成瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性研究.pdf

1、輻射致癌過程大致可以分為啟動、促進(jìn)及惡性進(jìn)展三個階段.為了在體外完整地建立起可以模擬輻射致癌各階段的細(xì)胞模型,該研究以該室已建立的α粒子輻射誘發(fā)的人支氣管上皮細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化株BERP35T4為基礎(chǔ),將該細(xì)胞接種于裸鼠皮下,在裸鼠體內(nèi)連續(xù)傳代三次后,觀察到該細(xì)胞獲得轉(zhuǎn)移潛能,將該腫瘤組織進(jìn)行體外分離腫瘤細(xì)胞并培養(yǎng)建系,獲得了具有轉(zhuǎn)移潛能的惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞系BERP35T4-Ta;該研究還以三種細(xì)胞系:BEP2D、BERP35T4及BERP35T

2、4-Ta為材料,分別從免疫組化、增殖速度、錨著獨立生長能力、血清抗性及染色體數(shù)日等方面對這三種細(xì)胞系的特性進(jìn)行了研究,還利用Transwell技術(shù)分析了BERP35T4-Ta的遷移能力,并進(jìn)一步分離出轉(zhuǎn)移細(xì)胞;最后利用微衛(wèi)星不穩(wěn)定性分析技術(shù)對腫瘤細(xì)胞系中抑癌基因的雜合性缺失情況進(jìn)行了檢測.該研究所獲得的主要結(jié)果如下:1.BERP35T4(immortalized human bronchial epithelial cell trans

3、formed byα-particles)成瘤性實驗:以永生化人支氣管上皮細(xì)胞BEP2D為對照,將BERP35T4細(xì)胞接種于5-6周齡裸鼠皮下,每組接種9只,雌雄兼半.16周后,對照組無一長出腫瘤(0/9),BERP35T4組相繼有4只長出腫瘤(4/9),其中1只裸鼠在其胸部及后肢出現(xiàn)肉眼可見的轉(zhuǎn)移瘤,經(jīng)解剖,發(fā)現(xiàn)肺部也出現(xiàn)轉(zhuǎn)移灶.2.BEP2D、BERP35T4和BERP35T4-Ta的細(xì)胞生物學(xué)特性研究:①細(xì)胞增殖能力.②錨著獨立生

4、長能力.③血清抗性.④染色體眾數(shù).⑤細(xì)胞的遷移能力.綜合以上實驗結(jié)果,該文認(rèn)為BERP35T4-Ta細(xì)胞具有較為典型的惡性腫瘤細(xì)胞的表型,并且還具有較高的轉(zhuǎn)移能力.3.微衛(wèi)星不穩(wěn)定性分析技術(shù)檢測抑癌基因的雜合性缺失:針對位于肺癌高缺失染色體區(qū)域的9個已知基因(FHIT、APC、PRLTS、p16、PTEN、p57、ATM、BRCA1、p53),選擇了16個位于基因內(nèi)或與基因緊密連鎖的微衛(wèi)星多態(tài)性位點,對上述三種細(xì)胞系(BEP2D、BER