大鼠心死亡供體肝臟熱缺血線粒體損傷的研究.pdf

1、目的：
　　 線粒體作為細(xì)胞器,是真核細(xì)胞活動(dòng)的主要供能單位,線粒體是細(xì)胞發(fā)生呼吸作用的主要場(chǎng)所。線粒體氧化磷酸化的電子傳遞鏈,又叫線粒體呼吸鏈,位于線粒體內(nèi)膜上,由四個(gè)分子量很大的跨膜蛋白復(fù)合體組成,功能是進(jìn)行生物氧化并產(chǎn)生能量分子ATP。線粒體功能直接影響組織器官的活性,到目前為止,在肝移植方面沒有很好的供體器官活性判定標(biāo)準(zhǔn)。本研究旨在從大鼠心死亡供體不同熱缺血時(shí)間肝臟線粒體形態(tài)及功能方面損傷的變化,探討心死亡供者肝臟活性,

2、為臨床肝移植提供心死亡供體肝臟活性的判定可行性。
　　 方法：
　　 對(duì)42例不同熱缺血時(shí)間條件下的心死亡大鼠肝臟標(biāo)本進(jìn)行超薄切片,透射電鏡觀察肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變并攝片。同時(shí)每組每個(gè)動(dòng)物切片隨機(jī)選擇5個(gè)視野,每個(gè)視野選取20個(gè)線粒體透射電鏡觀察線粒體結(jié)構(gòu)并行Flameng評(píng)分進(jìn)行半定量分析。提取肝臟線粒體,進(jìn)而運(yùn)用分光光度法測(cè)定呼吸鏈復(fù)合酶IV即細(xì)胞色素C氧化酶(CCO)的活性。單因素方差分析線粒體損傷程度及CCO活性與零點(diǎn)

3、病例變化差異。
　　 結(jié)果：
　　 電鏡下可見,10分鐘內(nèi)肝細(xì)胞無明顯改變,15分鐘之后變化明顯,表現(xiàn)為肝細(xì)胞的腫脹,糖原減少,細(xì)胞核染色質(zhì)濃縮。至熱缺血60分鐘,但大部分細(xì)胞仍為可逆性變化具有可復(fù)性,只有小部分細(xì)胞表現(xiàn)不可逆損傷。電鏡下觀察線粒體結(jié)構(gòu)損傷,Flameng評(píng)分隨著熱缺血時(shí)間的延長而增加,半定量分析P值小于0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但線粒體的損傷僅限于Ⅲ級(jí),極少部分達(dá)到Ⅳ級(jí)。線粒體CCO熱缺血60分鐘時(shí)才發(fā)生