子癇前期母血有核紅細(xì)胞數(shù)量和T淋巴細(xì)胞的變化及意義.pdf

1、子癇前期是孕婦和圍產(chǎn)兒病率及死亡率的主要原因之一，病因至今未明，隨著現(xiàn)代生殖免疫學(xué)發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)子癇前期可能是一種母胎免疫不相容疾病。胚胎是由繼承了父系及母系雙重組織特異性受精卵發(fā)育而來(lái)，所以它對(duì)母體來(lái)說(shuō)具有“自己”和“異己”的組織抗原特性。正常的胎盤(pán)并非是細(xì)胞密不可透的屏障，在人類(lèi)的妊娠中，胎兒血液可能進(jìn)入母體血液循環(huán)中。理論上母體對(duì)攜帶有父系抗原的胎兒細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生免疫反應(yīng)，但是正常妊娠期間并沒(méi)有發(fā)生母胎排斥現(xiàn)象，說(shuō)明母胎之間存在復(fù)雜而

2、完整的免疫耐受體系，一旦這種平衡被打破則導(dǎo)致病理妊娠，如流產(chǎn)、子癇前期等。從孕婦外周血分離出的胎兒細(xì)胞的類(lèi)型主要有滋養(yǎng)細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、粒細(xì)胞、胎兒有核紅細(xì)胞4種。目前主要是通過(guò)分離外周血胎兒有核紅細(xì)胞進(jìn)行產(chǎn)前診斷或妊娠相關(guān)疾病的研究。其原因以下：1．胎兒有核紅細(xì)胞生命周期較短，不受既往妊娠的干擾；2．含有全套的DNA遺傳信息，分離出來(lái)可直接用來(lái)進(jìn)行遺傳學(xué)分析；3．在其表面有多種特異性抗原如轉(zhuǎn)鐵蛋白受體等，能有效地從孕婦外周血中分離出來(lái)。

3、孕婦外周血50％有核紅細(xì)胞為胎兒來(lái)源，故定量分析孕婦外周血有核紅細(xì)胞可反映孕婦外周血胎兒抗原的水平。國(guó)外有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，子癇前期外周血有核紅細(xì)胞增多，并發(fā)生在臨床出現(xiàn)之前，但胎兒抗原成分增多在子癇前期發(fā)病的免疫學(xué)機(jī)制起什么作用還不十分清楚。本研究目的通過(guò)應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)子癇前期孕婦外周血有核紅細(xì)胞比例及細(xì)胞免疫功能的變化并與正常妊娠及未孕婦女進(jìn)行比較，了解子癇前期患者胎兒抗原數(shù)量的變化對(duì)母體免疫功能的影響及與病情輕重的關(guān)系，從而對(duì)子癇前

4、期發(fā)病機(jī)制有所認(rèn)識(shí)。 【材料與方法】 1．研究對(duì)象 選擇2005年11月至2006年6月在暨南大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院住院的子癇前期患者32例作為病例組，所有病例均符合《婦產(chǎn)科學(xué)》第六版子癇前期的診斷標(biāo)準(zhǔn)，其中重度組19例，輕度組13例。另選擇同期住院分娩的健康孕婦30例作為正常妊娠對(duì)照。所有孕婦均為單胎妊娠，年齡20～35歲，既往無(wú)慢性高血壓、糖尿病、腎炎、心臟病等內(nèi)科疾病，血紅蛋白≥100g／L，無(wú)吸煙、吸毒等不良

5、嗜好，無(wú)輸血、移植、免疫治療病史。選取同期來(lái)我院正常身體檢查，年齡20-35歲，未孕的健康婦女30例作為未孕對(duì)照組。 2．實(shí)驗(yàn)方法 2.1外周血淋巴細(xì)胞比例檢測(cè)：采用流式細(xì)胞儀定量檢測(cè)三組外周血中CD3<'+>、CD3<'+>CD4<'+>、CD3<'+>CD8<'+>、CD3<'+>CD4<'+>／CD3<'+>CD8<'+>、CD3<'->CD56+16<'+>淋巴細(xì)胞百分比。 2.2外周血有核紅細(xì)胞比例檢測(cè)

6、：應(yīng)用單密度梯度分離法分離孕婦外周血單個(gè)核細(xì)胞層，應(yīng)用CD71-FITC，CD13-PE，CD45-Cychrome三種抗體標(biāo)記細(xì)胞，采用流式細(xì)胞儀劃分CD71<'+>／CD13<'->CD45。區(qū)域，計(jì)算有核紅細(xì)胞占單個(gè)核細(xì)胞的百分比，選擇臍血作為陽(yáng)性對(duì)照及未孕婦女外周血作為陰性對(duì)照。 3．統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS11.0版本軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，測(cè)定結(jié)果以x±s表示，各組的年齡、孕次、孕周、平均動(dòng)脈壓及外周

7、血淋巴細(xì)胞比例及有核紅細(xì)胞比例采用獨(dú)立樣本均數(shù)t檢驗(yàn)。外周血有核紅細(xì)胞比例與淋巴細(xì)胞水 平及平均動(dòng)脈壓相關(guān)性應(yīng)用秩相關(guān)分析，計(jì)算Spearman相關(guān)系數(shù)。 【結(jié)果】 1、一般情況：將未孕組、正常妊娠組、病例組的年齡、孕次進(jìn)行比較，各組之間比較無(wú)顯著性差異(P>0.05)，病例組與正常妊娠組的孕周比較無(wú)差異性。病例組MAP(平均動(dòng)脈壓)與正常妊娠組比較明顯升高(P<0.05)。 2、外周血淋巴細(xì)胞比例的比較：病例

8、組與正常妊娠組比較，總T淋巴細(xì)胞無(wú)差異性，CD4<'+>T細(xì)胞增加(P<0.001)，CD8<'+>T細(xì)胞下降(P<0.001)，(2D4<'+>／CD8<'+> 升高(P<0.001)，與未孕比較無(wú)差異性(P>0.05)；病例組NK細(xì)胞與正常妊娠無(wú)差異性，重度組較輕度組明顯升高(P<0.001)。 3、外周血有核紅細(xì)胞比例比較：未孕婦女外周血幾乎不含有有核紅細(xì)胞，有核紅細(xì)胞陽(yáng)性表達(dá)率0.034±0.026％；正常妊娠組有核紅

9、細(xì)胞比例0.96± 0.85％，病例組2.74±1.08％，較正常妊娠組有顯著性差異(P<0.001)；將病例組按病情程度分為輕度及重度兩組并與正常比較，兩兩比較均有顯著性差異(P<0.01)。 4、子癇前期外周血有核紅細(xì)胞數(shù)量與外周血淋巴細(xì)胞水平相關(guān)性分析：對(duì)子癇前期外周血CD3<'+>、CD4<'+>、CD8<'+>、CD4<'+>／CD8<'+>、NK細(xì)胞進(jìn)行相關(guān)分析，發(fā)現(xiàn)子癇前期外周血有核紅細(xì)胞比例與CD4<'+>／C

10、D8<'+>正相關(guān)，r=0.838，P<0.001;與CD8<'+>細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，r=-0.769，P<0.001． 5、子癇前期外周血有核紅細(xì)胞數(shù)量與平均動(dòng)脈壓相關(guān)性分析：子癇前期外周 血有核紅細(xì)胞比例與平均動(dòng)脈壓呈正相關(guān)，r=0.689，P<0.001． 【結(jié)論】 1、子癇前期患者外周血中有核紅細(xì)胞數(shù)量較正常孕婦升高，說(shuō)明子癇前期的發(fā)病與進(jìn)入母體內(nèi)的胎兒抗原成分增多有關(guān)。 2、子癇前期孕婦體內(nèi)T淋巴