組織芯片結(jié)合免疫組化研究人胃癌Galectin-3和VEGF的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的:應(yīng)用組織芯片技術(shù)結(jié)合免疫組化鏈霉素抗生物素蛋白-過(guò)氧化酶法(Streptavidin Perioxidase,SP)探討胃癌組織中半乳糖凝集素-3(Galectin-3)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子蛋白(vascular eradothelial growthfactor,VEGF)的表達(dá)及其臨床意義,以及它們與胃癌臨床病理特征之間的關(guān)系,進(jìn)一步探討它們之間的相關(guān)性及兩者與胃癌侵襲轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系。
　　 方法:101例胃癌組織標(biāo)本

2、為2003年1月到2004年6月間南昌大學(xué)第二附屬醫(yī)院胃癌根治術(shù)手術(shù)切除標(biāo)本,術(shù)前均未行放療和化療,術(shù)后病理論斷為胃癌,并記錄其完整的臨床病理資料。TNM分期:Ⅰ A期6例,Ⅰ B期7例,Ⅱ期19例,ⅢA期31例,ⅢB期18例,Ⅳ期20例。另取20例距腫瘤邊緣5cm以上正常胃黏膜組織做對(duì)照。采用組織芯片技術(shù)建立101例胃癌組織及20例正常胃黏膜組織的組織芯片,每張組織芯片上有20-25個(gè)樣本,以4×5或5×5組織微陣列排列,外形為圓形或

3、類圓形。對(duì)組織芯片蠟塊進(jìn)行4μm厚連續(xù)切片,每10張切片取1張進(jìn)行HE染色以鑒別組織學(xué)類型是否仍具有代表性,并且采用免疫組織化學(xué)SP法檢測(cè)Galectin-3和VEGF蛋白在胃癌及正常胃黏膜組織中的表達(dá)。用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,以p值為0.05作為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果:
　　 1、本實(shí)驗(yàn)制備組織芯片蠟塊5塊,結(jié)果顯示在全部深約3mm的陣列蠟塊里,幾乎所有標(biāo)本均能保持它們的組織學(xué)類型特征,較

4、少出現(xiàn)皺褶和掉片現(xiàn)象。
　　 2、Galectin-3陽(yáng)性顆粒在細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)都有表達(dá),主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)；胃癌組織中Galectin-3的陽(yáng)性表達(dá)率為85.1％(86/101),明顯高于正常胃黏膜組織35.0％(7/20)(p<0.05)。Galectin-3在胃癌中的表達(dá)與胃癌浸澗深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及臨床分期明顯相關(guān)(p<0.05),而與患者年齡、性別、分化程度無(wú)顯著性意義(p>0.05)。
　　 3、VEG

5、F陽(yáng)性顆粒主要表達(dá)于細(xì)胞質(zhì),少數(shù)表達(dá)于細(xì)胞核。胃癌組織中VEGF的陽(yáng)性表達(dá)率為76.2％(77/101),明顯高于正常胃黏膜組織25.0％(5/20)(p<0.05)。VEGF在胃癌中的表達(dá)與胃癌浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移以及臨床分期明顯相關(guān)(p<0.05),與患者年齡、性別、分化程度無(wú)顯著性意義(p>0.05)。
　　 4、Spearman相關(guān)性檢驗(yàn)顯示,Galectin-3和VEGF之間存在顯著性關(guān)系。r's=0.484

6、3,p<0.05,提示二者之間呈正相關(guān)。
　　 5、101例胃癌患者因客觀因?yàn)槭гL12例,隨訪到89例,于5年內(nèi)復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移47例,死亡36例,胃癌組織中Galectin-3陽(yáng)性表達(dá)率為97.2％(35/36),明顯高于生存期大于5年者77.4％(41/53)(p<0.05)；VEGF陽(yáng)性表達(dá)率為94.4％(34/36),明顯高于生存期大于5年者79.2％(42/53)((p<0.05)。提示胃癌組織中Galectin-3和VEGF

7、陽(yáng)性表達(dá)患者,在5年內(nèi)復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移者居多,生存期大于5年者少。
　　 結(jié)論:
　　 1、組織芯片具有高通量、多樣本、省時(shí)省力、降低誤差、便于設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)照、可與其他多種生物技術(shù)相結(jié)合等多種優(yōu)點(diǎn),在腫瘤早期診斷,療效判斷及預(yù)后預(yù)測(cè)的分子標(biāo)志物篩選方面有重大的實(shí)用價(jià)值和應(yīng)用前景。
　　 2、Galectin-3與VEGF蛋白的表達(dá)與胃癌的侵襲生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移有顯著相關(guān)性。
　　 3、Galectin-3與V:EGF蛋白