bGFG對早產(chǎn)兒腦室周圍白質軟件動物模型內囊區(qū)O1和O4表達的影響.pdf

1、目的：通過比較不同的缺血方式建立與人類早產(chǎn)兒腦室周圍白質軟化相似的PVL動物模型，并探討外源性給予堿性成纖維細胞生長因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)對新生鼠腦室周圍白質軟化(PVL，Periventricular Leukomalacia)動物模型的內囊區(qū)04、01表達的影響。
　　 方法：選擇2日齡新生SD大鼠，通過結扎單側或雙側頸總動脈并缺氧(8％O2+92％N2)1小時制備PV

2、L動物模型，并予bFGF干預，分為假手術組、單側結扎頸總動脈組(單側組)、單側干預組、雙側結扎頸總動脈組(雙側組)、雙側干預組。分別于術后4d比較各組動物的死亡率，動態(tài)觀察各組大鼠的生長發(fā)育情況，于術后4d，14d，26d比較各組大鼠的體重變化情況，觀察各組大鼠的眼部伴隨癥狀，并分別于術后4天、11天、18天、25天行腦組織病理檢查及通過免疫組織化學染色方法和計算機圖像分析技術檢測各組大鼠各個時點內囊區(qū)04、01的表達情況。
　　

3、 結果：
　　 1.死亡率比較：雙側組與單側組死亡率均較高，兩者與假手術組比較差異均有統(tǒng)計學意義(p<0.05)；兩者間相比較其差異也有統(tǒng)計學意義(p=0.05)；兩者與干預組比較差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。
　　 2.生長發(fā)育情況
　　 (1)體重情況：五組大鼠的體重有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。雙側組在各個時間點體重最低，顯著低于假手術組、雙側干預組及單側組，其差異均有統(tǒng)計學意義p<0.05)，單側組

4、體重在術后26d較假手術組及單側干預組低，其差異有統(tǒng)計學意義(p<0.05)。(2)伴隨眼部癥狀：雙側組及雙側干預組肉眼及裂隙燈檢查均可見不同程度的眼部病變，其他組無眼部病變。
　　 3.腦組織大體病理改變：術后21天雙側組及雙側干預組腦組織腦室周圍白質局部有軟化灶、蒼白區(qū)，前者較重；單側組可見腦室內出血，腦室周圍白質局部可見蒼白區(qū)；單側干預組僅見腦室內出血；假手術組無明顯異常。各組皮質區(qū)大體病理均未見明顯異常。
　　

5、4.光鏡下病理改變：病變主要發(fā)生在腦室周圍白質區(qū)，皮質下、扣帶回、內囊、外囊區(qū)。假手術組未見異常，雙側組及雙側干預組病變較重。術后4天，模型組均可見組織結構疏松，神經(jīng)細胞水腫、壞死，小膠質細胞較多，皮質損傷輕微，層次清楚；雙側組及雙側干預組可見皮質下及腦室周圍白質區(qū)可見液化性壞死，雙側干預組腦組織病理改變相對較雙側未干預組損害輕；單側組及單側干預組未見液化性壞死。術后11天及18天，模型組細胞水腫逐漸消退，細胞肥大、增生，小膠質細胞增多

6、明顯，皮質及白質區(qū)小血管逐漸增多，白質神經(jīng)纖維較前逐漸增多，且大量膠質增生；雙側組及雙側干預組甚有膠質瘢痕形成，腦室周圍白質有不同程度的萎縮變窄，白質局部可見軟化灶，但神經(jīng)纖維較其他組少；單側組腦室周圍白質也有不同程度的萎縮變窄，較雙側組輕，且膠質瘢痕形成較少。術后25天，模型組小膠質細胞數(shù)量較前減少，余同術后18天。
　　 5.免疫組織化學染色
　　 (1)O4的表達：五組大鼠04陽性細胞數(shù)在各個時間點均有統(tǒng)計學差異(

7、p<0.01)，術后4d、11d、18d及25d各組大鼠04陽性細胞數(shù)差異也有統(tǒng)計學差異(p<0.01)。五組大鼠O4陽性細胞數(shù)隨著日齡的增加而變化，以假手術組均值曲線為標準線，各組O4陽性細胞數(shù)在術后4d與術后18d之間各組波動范圍較大，但術后18d到術后25d之間趨于穩(wěn)定，并靠近假手術組水平，且發(fā)現(xiàn)雙側干預組與單側干預組曲線走形相似，假手術組與單側組曲線走形相似，術后4d到術后18d，兩種走形方向剛好相反。
　　 (2)O1

8、的表達：五組大鼠O1陽性細胞數(shù)在各個時間點均有統(tǒng)計學差異(P<0.01)，術后4d、11d及18d各組大鼠O1陽性細胞數(shù)也有統(tǒng)計學差異(p<0.01)，術后25d無統(tǒng)計學差異(p>0.01)。五組大鼠O1陽性細胞數(shù)隨著日齡的增加而變化，以假手術組曲線為標準線，各組在術后4d與術后18d之間均呈上升趨勢，術后18-25d升高的單側干預組、雙側組及雙側干預組逐漸下降，三組的大致走形趨勢相似，而單側組則繼續(xù)緩慢增加，最后各組大鼠均靠近于假手術

9、組水平。
　　 結論：
　　 1、通過對2日齡新生SD大鼠進行單側或雙側頸總動脈結扎加8％缺氧的方法，均可建立與人類早產(chǎn)兒腦室周圍白質軟化病理相似的PVL動物模型，并通過比較發(fā)現(xiàn)，結扎雙側頸總動脈較單側結扎頸總動脈腦損傷重，更符合早產(chǎn)兒PVL病理改變。
　　 結論：
　　 1、通過對2日齡新生SD大鼠進行單側或雙側頸總動脈結扎加8％缺氧的方法，均可建立與人類早產(chǎn)兒腦室周圍白質軟化病理相似的PVL動物模型，