高脂狀態(tài)下血管靶向基因給藥系統(tǒng)相關(guān)問(wèn)題的研究.pdf

1、目的:比較常用的兩種報(bào)告基因β-Gal及GFP在大鼠多器官組織中的內(nèi)源性表達(dá)及不同血脂水平下的變化,為構(gòu)建基因靶向給藥系統(tǒng)時(shí)報(bào)告基因的合理選擇提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).方法:16只SD雄性大鼠,隨機(jī)分為正常和高脂2組,每組8只,以喂養(yǎng)法建立高血脂動(dòng)物模型.試驗(yàn)結(jié)束時(shí),大鼠頸椎脫位處死,取11個(gè)器官組織,常規(guī)冰凍切片,采用酶組化法檢測(cè)各組織中β-Gal的活性,普通顯微鏡下觀察、拍照;采用熒光法檢測(cè)各組織中GFP的熒光強(qiáng)度并拍照.結(jié)果:正常及高脂大鼠的

2、肝臟、脾臟、肺、腎臟、淋巴結(jié)、甲狀腺、空腸、腦均呈β-gal陽(yáng)性,血管(胸主動(dòng)脈)、心臟、膈肌呈β-gal陰性;血管(胸主動(dòng)脈)、肝臟、脾臟、肺、腎臟、膈肌、甲狀腺、有自發(fā)熒光;心臟、腦、淋巴結(jié)、空腸無(wú)自發(fā)熒光,血脂水平對(duì)結(jié)果無(wú)明顯影響.結(jié)論1在經(jīng)典X-gal染色條件下,正常大鼠血管、心臟、膈肌為陰性表達(dá),可用表達(dá)β-gal的LacZ基因作報(bào)告基因;而肝臟、脾臟、肺、腎臟、淋巴結(jié)、甲狀腺、腦、空腸等器官組織在選擇報(bào)告基因時(shí)最好避開(kāi)表達(dá)β