牙乳頭干細胞分離、培養(yǎng)的研究.pdf

1、目的:探討從人未發(fā)育完全的前磨牙牙根尖部牙乳頭中分離、培養(yǎng)牙乳頭干細胞的方法,以期為組織工程在牙體及牙髓組織再生領域的應用找到更好的細胞來源。
　　 方法:取10至13歲接受正畸治療的患者獲取拔除的前磨牙；使用挖勺在尚未形成根尖的牙根部分離牙乳頭組織；采用組織塊貼壁培養(yǎng)法從牙乳頭組織中分離出牙乳頭干細胞,并計算細胞集落形成率；應用免疫熒光、流式細胞儀檢測牙乳頭干細胞的標記物。
　　 結果:組織塊培養(yǎng)獲得的第二代牙乳頭干細

2、胞在體外集落形成率為10～20colonies/103細胞；牙乳頭干細胞貼壁生長,呈長梭形或多角形,核漿比大；原代培養(yǎng)細胞生長緩慢(約35天傳代),傳代后的細胞生長快(3-5天一代),可連續(xù)傳12代以上；牙乳頭干細胞堿性磷酸酶陽性率為33.2％、巢蛋白陽性率為96.8％、波形蛋白陽性率為93.9％、Stro-1陽性率為48.5％、CD90陽性率為92.1％,但牙本質涎蛋白為陰性(<1％)。
　　 結論:使用組織塊貼壁培養(yǎng)法能夠有