vegf-4敲減小鼠肉瘤細(xì)胞系MS-K喪失腫瘤形成能力的機(jī)制的研究.pdf

1、近年來(lái)，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子及其受體家族倍受關(guān)注，引發(fā)各國(guó)研究人員的廣泛研究，特別是VEGF-A與其受體VEGFR-1和VEGFR-2。目前已證實(shí)VEGF-A與其受體VEGFR-1和VEGFR-2介導(dǎo)的信號(hào)通路，無(wú)論是在正常生理?xiàng)l件下，或是在多種癌癥的病理狀態(tài)下，都有促進(jìn)體內(nèi)某些細(xì)胞的增殖存活以及誘導(dǎo)血管系統(tǒng)的發(fā)生發(fā)展等功效。 本文實(shí)驗(yàn)工作證實(shí)，vegf-A敲減的小鼠肉瘤細(xì)胞系MS-K細(xì)胞體內(nèi)誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生的能力完全被阻遏，無(wú)法在體內(nèi)

2、異體移植時(shí)產(chǎn)生腫瘤。實(shí)驗(yàn)確證了MS-K細(xì)胞的這一特性，并發(fā)現(xiàn)該細(xì)胞誘導(dǎo)的腫瘤具有豐富的血管網(wǎng)絡(luò)，且無(wú)遷移轉(zhuǎn)化現(xiàn)象發(fā)生。觀察到MS-K細(xì)胞轉(zhuǎn)化小鼠血細(xì)胞變化趨勢(shì)與其腫瘤組織的生長(zhǎng)進(jìn)度有著極大的相關(guān)性。這說(shuō)明血管發(fā)生在腫瘤進(jìn)程中發(fā)揮至關(guān)重要的作用。與MS-K和RNAi陰性對(duì)照MS-K-SCR細(xì)胞相比，vegf-A敲減MS-K細(xì)胞（MS-K-VEGFA-KD）在接種于低濃度血清供應(yīng)的培養(yǎng)液中時(shí)，其生長(zhǎng)受到抑制，明顯緩于上述兩種細(xì)胞，且在達(dá)到匯

3、合率前便進(jìn)入凋亡期。而且，MS-K-VEGFA-KD細(xì)胞在體內(nèi)無(wú)法誘導(dǎo)腫瘤形成，其轉(zhuǎn)化的小鼠在轉(zhuǎn)化50日內(nèi)未生成腫瘤，并且無(wú)明顯異?，F(xiàn)象出現(xiàn)，與正常小鼠無(wú)異。該結(jié)果表明，MS-K細(xì)胞中可能存在’VEGF-A自分泌環(huán)路信號(hào)，且該信號(hào)通路會(huì)對(duì)MS-K細(xì)胞產(chǎn)生影響。實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)到，VEGF與VEGFR家族中一些成員在體外培養(yǎng)的MS-K細(xì)胞和MS-K細(xì)胞轉(zhuǎn)化形成的腫瘤組織細(xì)胞中有一定量的表達(dá)，如VEGF-A和VEGFR-2。這也為上述觀點(diǎn)提供了佐

4、證。此外，MS-K-VEGFA-KD細(xì)胞在低血清濃度下的克隆形成率，較之MS-K和RNAi陰性對(duì)照MS-K-SCR細(xì)胞也比較低；而高血清濃度下則與二者無(wú)顯著差異。說(shuō)明高濃度血清供給的VEGF-A可以滿足MS-K-VEGFA-KD細(xì)胞的生長(zhǎng)需求；而當(dāng)生長(zhǎng)于低濃度血清條件下，MS-K-VEGFA-KD細(xì)胞無(wú)法合成足夠量的VEGF-A來(lái)促進(jìn)其自身生長(zhǎng)增殖。因此，MS-K-VEGFA-KD細(xì)胞在缺乏外源VEGF-A供給的培養(yǎng)條件下，生長(zhǎng)增殖緩慢