苦參堿誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞凋亡的體外研究.pdf

1、研究背景：視網(wǎng)膜母細胞瘤（retinoblastoma，Rb）是嬰幼兒最常見的原發(fā)性眼內(nèi)惡性腫瘤，在我國治療以眼球摘除及眼外放療為主，而發(fā)達國家越來越趨向用個性化綜合治療，其中包括眼球摘除、外照射放療(EBRT)、近距放療、溫?zé)岑煼ǎ═TT）、化學(xué)減容、全身化療等。而化學(xué)治療是保守治療的主要方法之一。苦參堿(matrine，Mat)是傳統(tǒng)中藥苦豆子等的主要有效成分。多項體外研究發(fā)現(xiàn)苦參堿具有劑量、時間依賴性地誘導(dǎo)多種腫瘤細胞發(fā)生凋亡的作

2、用，小劑量苦參堿也可抑制腫瘤細胞增殖與誘導(dǎo)細胞分化。
　　 目的：探討苦參堿體外誘導(dǎo)人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞株凋亡作用，為其在視網(wǎng)膜母細胞瘤治療中的應(yīng)用前景提供實驗依據(jù)。
　　 方法：以體外培養(yǎng)的人視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞株為研究對象，0.4mmol/L濃度的苦參堿分別作用視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞（Rb）12小時、24小時、48小時，陰性對照組以等量含10％類標準胎牛血清 RPMI-1640 培養(yǎng)液替代苦參堿。離心，收集細胞，用冷PBS

3、洗滌三次，依據(jù)AnnexinV-FITC/PI雙染試劑盒說明染色，流式細胞儀檢測細胞凋亡率。并進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　 結(jié)果：苦參堿作用視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞（Rb）12h后可觀察到細胞開始凋亡，48h內(nèi)呈時間依賴性。流式細胞儀檢測未經(jīng)藥物作用的細胞凋亡率僅為6.71±0.31％,加入作用12小時后，細胞凋亡率增加至14.88±0.99％,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。隨著作用時間的延長，細胞凋亡率逐步增加，24小時細胞凋亡率達到2