利用寡核苷酸芯片檢測部分白血病相關基因改變.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、第三軍醫(yī)大學碩士學位論文利用寡核苷酸芯片檢測部分白血病相關基因改變姓名：李焱申請學位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學指導教師：梁后杰20030501第三軍醫(yī)大學碩士學位論文DetectingSomeKindsofGeneChangesinLeukemiawithOligonucleotideMicroarrayAbstractohjective：TherearemanygeneticsubstancechangesinleukemiaPhchro

2、mosomeisthefirstoneofthechromosomesthatiSfoundtObeassociatedwithleukemiaWhatthePhchromosomecauseistheformationofBCR—ABLfusiongenewhichcanbeseeninnearly90％ofCMLpatientsPhnegativepatientsalsocanbedividedintotwogroupsbasedo

3、nhavingornothavingtherearrangementofBCRThetwogroupshavedifferentprognosisBesidesthegenechangesdirectlyassociatedwithkaryotype，therearemanyothergeneabnormalitiesinleukemiaForexample，wecanseeP53andKrasgenemutationsinmanysp

4、eciesoftumorTheyalsocanbeseeninleukemiaTheinactivationofP53isassociatedwiththeacutetransformationphaseanddevelopmentofCMLAlthoughKrasmutationisnotseenfrequentlyinleukemia，itisalseportedtOplayaroleinthepathogenesisanddeve

5、lopmentofleukemiaSowecanseetheimportanceofdetectionofgenechangesindiagnosis，disease。typing，therapyandjudgmentofprognosisofleukemiaInthisexperiment，weprepareoligonucleotidemicroarraytOdetectthetWOkindsofgene—changesinleuk

6、emiaMethods：AfterpreparingtheoligonucleotidemicroarrayweadoptedtwowaystodetectfusiongeneandgenemutationsrespectivelyAsforthefusiongene，wechosetwocellstrainsasthedetectiontargetsOnewasknownexpressingtheBCRABLfusiongeneand

7、theotherwasnotCelltotalRNAwasextracted，andthenitwasreverse—transcriptedandfluorescencelabeledAtlasttheeDNAwashybridizedwiththemicroarrayForthegenemutations，thebonemarrowsampleswerecollectedfromthepatientsandthegenomeDNAw

8、aSextractedWeamplifiedandlabeledthetargetsequencesbyPCRThenthePCRproductwashybridizedwiththemicroarrayResults：Thepreparedchiphadwell—distributedbackgroundandtheprobeblotchesonitwereregularFromthehybridizationresults，wesa

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