子癇前期患者胎盤和血清中脂聯(lián)素和抵抗素的表達(dá)及相關(guān)性.pdf

1、背景與目的:
　　 子癇前期(preeclampsia,PE)是妊娠期特有的疾病,是導(dǎo)致孕產(chǎn)婦和圍產(chǎn)兒發(fā)病率和死亡率升高的主要原因,其病因及發(fā)病機(jī)制至今尚不清楚。其基本病理生理改變?yōu)槿焉飲D女全身廣泛的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷,導(dǎo)致血管痙攣、腎小球損害及血管滲透性增加,從而引起高血壓和蛋白尿。目前認(rèn)為血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂是子癇前期發(fā)病的重要環(huán)節(jié)。血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂與血管內(nèi)皮細(xì)胞的炎性反應(yīng)、脂肪細(xì)胞的脂解作用以及胰島素抵抗(IR)有關(guān),脂

2、聯(lián)素(Adiponectin)和抵抗素(Resistin)同為脂肪細(xì)胞分泌的特異性激素蛋白,共同參與了血管內(nèi)皮細(xì)胞的炎性反應(yīng)。目前國內(nèi)外關(guān)于脂聯(lián)素和抵抗素在子癇前期中的表達(dá)存在著爭議,本研究主要是通過檢測脂聯(lián)素和抵抗素在子癇前期胎盤和血清中的表達(dá)情況及相關(guān)性,以研究其在子癇前期發(fā)生發(fā)展中的作用及意義。
　　 脂聯(lián)素(Adiponectin)也稱Acrp30、AdipoQ、Gbp28,是由脂肪細(xì)胞分泌的一種激素蛋白。它能顯著改善血

3、管炎性反應(yīng),減少血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,它的表達(dá)水平降低能引起血管內(nèi)皮細(xì)胞功能紊亂。脂聯(lián)素作為一種脂源性分泌的血管內(nèi)皮保護(hù)因子與子癇前期的關(guān)系為許多研究所關(guān)注,有研究表明在人類胎盤的絨毛細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞和合體滋養(yǎng)細(xì)胞存在脂聯(lián)素、脂聯(lián)素受體及脂聯(lián)素mRNA的表達(dá)。但隨著研究進(jìn)展發(fā)現(xiàn),脂聯(lián)素在子癇前期中的表達(dá)量存在著爭議。抵抗素(Resistin)是存在于血漿中的富含半胱氨酸的分泌性蛋白,同樣是一種脂肪細(xì)胞來源的激素。人抵抗素基因在脂肪組織、胎盤、

4、外周血的單核巨噬細(xì)胞及骨髓中均有表達(dá)。抵抗素的生理功能有消弱胰島素的作用,產(chǎn)生胰島素抵抗,參與細(xì)胞炎性反應(yīng),在細(xì)胞及體液免疫調(diào)節(jié)中亦起一定的作用。自發(fā)現(xiàn)抵抗素以來,國內(nèi)外研究的重點(diǎn)主要集中在其與肥胖、代謝綜合征、糖尿病及動(dòng)脈粥樣硬化疾病之間的關(guān)系,近年來研究發(fā)現(xiàn),抵抗素與妊娠及子癇前期有著密切的聯(lián)系,但目前關(guān)于抵抗素在子癇前期中的表達(dá)量存在著爭議,為此我們也進(jìn)行如下研究以進(jìn)一步探討其在子癇前期中的表達(dá)及意義。
　　 本研究采用半

5、定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription polymerasechain reaction,RT-PCR)方法檢測重度子癇前期和輕度子癇前期及正常孕婦胎盤組織中脂聯(lián)素和抵抗素的表達(dá)情況,并用ELISA法檢測血清脂聯(lián)素和抵抗素在重度子癇前期和輕度子癇前期患者及正常孕婦中的表達(dá)水平,分析脂聯(lián)素和抵抗素與子癇前期的關(guān)系,及兩者之間的相關(guān)性,探討兩者在子癇前期發(fā)生發(fā)展中的作用及相關(guān)性,進(jìn)一步揭示子癇前期可能的分子生物學(xué)

6、發(fā)病機(jī)制。
　　 材料與方法:
　　 1、臨床病例資料
　　 標(biāo)本選自2009年5月至2009年12月在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科住院的孕婦,其中正常妊娠組30例作為對(duì)照組,子癇前期患者40例作為實(shí)驗(yàn)組(其中輕度子癇前期20例,重度子癇前期20例)。子癇前期的診斷標(biāo)準(zhǔn),參照樂杰主編的全國高等院校統(tǒng)編教材《婦產(chǎn)科學(xué)》(第7版)標(biāo)準(zhǔn)。兩組孕婦年齡、身高、體重及孕周、孕次等一般資料經(jīng)檢驗(yàn)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05

7、)。所有病例均排除原發(fā)性高血壓、心臟病、腎病、糖尿病、肝炎、血小板較少、甲狀腺功能亢進(jìn)等病史,無吸煙、飲酒、輸血、免疫治療病史等。分娩方式均選擇剖宮產(chǎn),無胎膜早破及感染征象。
　　 2、實(shí)驗(yàn)方法
　　 運(yùn)用RT-PCR方法從基因水平分別檢測子癇前期孕婦和正常孕婦胎盤組織中脂聯(lián)素和抵抗素的表達(dá),并應(yīng)用ELISA法從蛋白質(zhì)水平檢測脂聯(lián)素和抵抗素在子癇前期孕婦和正常孕婦血清中的表達(dá)水平。
　　 3、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　

8、　 本組數(shù)據(jù)采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,結(jié)果以(x)±S表示,統(tǒng)計(jì)方法為定量資料采用單因素方差分析,兩兩比較用LSD-t檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Pearson統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,以a=0.05為統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1、脂聯(lián)素mRNA和抵抗素mRNA在重度子癇前期胎盤組織中的表達(dá)量分別為(0.403±0.145)和(0.104±0.067),均低于正常對(duì)照組的(0.838±0.3

9、24)和(0.427±0.023),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,P=0.000),在輕度子癇前期胎盤組中的表達(dá)量分別為(0.659±0.018)和(0.301±0.109),均低于正常對(duì)照組的(0.838±0.324)和(0.427±0.023),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,P=0.000)。但輕、重度子癇前期比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.132,P=0.270)。
　　 2、脂聯(lián)素蛋白和抵抗素蛋白在重度子癇前期血清

10、中的表達(dá)量為(5.54±2.89)和(5.16±1.48),均低于正常對(duì)照組的(11.38±2.3)和(15.35±2.78),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,P=0.000),在輕度子癇前期組血清中的表達(dá)量為(8.75±3.01)和(7.30±3.44),均低于正常對(duì)照組的(11.38±2.3)和(15.35±2.78),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.001,P=0.000),但輕、重度子癇前期比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P=0.230,P

11、=0.291)。
　　 3、進(jìn)行兩者相關(guān)性比較,脂聯(lián)素和抵抗素在重度子癇前期患者胎盤及血清中的表達(dá)均呈正相關(guān)性(r=0.417,r=0.262,P均<0.05),但在輕度子癇前期及正常對(duì)照組中無相關(guān)性(P均>0.05)。
　　 結(jié)論:
　　 1、脂聯(lián)素mRNA和及其蛋白在重度子癇前期胎盤組織及血清中的表達(dá)均低于正常對(duì)照組,提示其低表達(dá)在子癇前期的發(fā)生發(fā)展中可能起一定的作用。抵抗素mRNA和及其蛋白在重度子癇前期胎