油菜菌核病菌對腐霉利的抗性及其機制.pdf

1、從江蘇省鎮(zhèn)江市和揚州市采集病樣，分離獲得油菜菌核病菌168個菌株。依據(jù)32個野生菌株藥劑敏感性(EC50)頻率分布，菌株對腐霉利的敏．感基線測定為O.1981±0.02200μg/mL(EC50)和1.1±0.1595μg/mL(MIC)。以5μg/mL(MIC)檢測標準，未發(fā)現(xiàn)田間抗腐霉利菌株。通過紫外線和藥劑誘導，獲得高抗腐霉利突變株(ECso>1000μg/mL)。經(jīng)轉(zhuǎn)管培養(yǎng)20次后，這些抗藥菌株抗性表現(xiàn)穩(wěn)定。 以腐霉利敏

2、感菌株YDll8及其誘變產(chǎn)生的抗性菌株YDll-4R、YDll-7R、YDllAR進行比較研究，發(fā)現(xiàn)抗性突變株菌絲生長較慢；對離體和田間植株的致病力較弱。但是，在一定濃度(0.5~21μg/mL)腐霉利處理后，敏感菌株菌絲扭曲，分支增加且短小，甚至細胞腫脹、破裂，原生質(zhì)外滲，而抗藥菌株菌絲形態(tài)則無明顯變化。 與敏感菌株相比，腐霉利抗性菌株無論在高糖(>40g/L蔗糖)還是高鹽(>5g/L NaCl)培養(yǎng)基上均對高滲透壓比較敏感，

3、并且菌絲相對電導率較高。這顯示抗腐霉利菌株細胞膜透性增大，胞內(nèi)電解質(zhì)滲出較多。試驗還發(fā)現(xiàn)，在含藥培養(yǎng)液中，腐霉利敏感菌株菌絲內(nèi)甘油大量合成和積累，增加462.45％，而抗性菌株菌絲內(nèi)甘油含量僅稍有增加或有所下降。這表明抗腐霉利菌株對外界滲透壓的調(diào)節(jié)能力要低于敏感菌株。 根據(jù)已報道AaHKl序列設計特異引物，經(jīng)PCK擴增和測序，獲得腐霉利敏感菌株YDlls和抗性菌株YDll-4R、YDll-7R、YDllAR組氨酸激酶基因保守區(qū)域