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文檔簡介
1、目的:研究地塞米松(DEX)對順鉑(CDDP)引起的人肺腺癌細胞SPC-A1凋亡的抑制作用及探討其初步的分子機制。 方法:采用人肺腺癌細胞SPC-A1,分別加入不同濃度的DEX體外誘導培養(yǎng),24小時后加入不同濃度的CDDP繼續(xù)培養(yǎng)48小時,用MTT法檢測細胞的存活率;再用1μmol/LDEX刺激SPC-A1細胞,分別于1hr、2hr、4hr、6hr、12hr提取細胞的總RNA:采用半定量RT-PCR技術,檢測SPC-A1細胞中的
2、血清/糖皮質激素-誘導激酶(SGK-1)和有絲分裂原蛋白激酶(MKP-1)的表達:同時用生物素標記的抗糖皮質激素受體(GR)抗體對SPC-A1細胞行免疫組化染色來檢測GR的表達。 結果:SPC-A1細胞經(jīng)DEX誘導后,對CDDP所致的凋亡有抵抗作用并與DEX濃度呈劑量依賴關系。DEX刺激后的SPC-A1細胞表達SGK-1,在12hr時表達達高峰;細胞免疫組化顯示SPC-A1細胞經(jīng)DEX刺激后GR上調,細胞內GR表達的陽性細胞數(shù)明
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